肌酸激酶(CK)测定-标准操作程序.doc

三级文件 肌酸激酶(CK)测定标准操作程序 文件编号： 版本/状态：A/1 第2页 共3页 生效日期： 目的：规范肌酸激酶(CK)测定标准操作规程。 范围：适用于肌酸激酶(CK)测定的标准操作。 职责：生化部检验人员对本规程的实施负责。 规程： 1 测定方法：采用酶动力学法，定量测定血清中血清肌酸激酶(CK)的含量。 2 测定原理 肌酸激酶 磷酸肌酸 ＋ ADP 肌酸 ＋ ATP 己糖激酶 ATP ＋ 葡萄糖 葡萄糖-６-磷酸 ＋ ADP 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 葡萄糖-６-磷酸 ＋ NADP＋ 果糖-６-磷酸 ＋ NADPH ＋ H＋ 3 标本 血清，肝素或EDTA抗凝血浆，处理方法见标本准备。 稳定性：20-25℃ 2天 4－8℃ 7天 -20℃ 4周 4 试剂 4.1试剂 来源：ROCHE配套 试剂（详见试剂说明书）。 贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末 R1：打开后机上稳定21天 R2：打开后机上稳定21天 准备：a. R1:将试剂R1与1a互溶后使用。 b. R2:将试剂R2与2a互溶后使用。 4.2 校准物 来源：ROCHE配套校准物,具体如下： S1：生理盐水 S2：C.f.a.s 贮存条件：校准物在2-8℃保存可保存至有效期。 准备：直接使用。 定标频率：A试剂盒在仪器上放置28天后 B 试剂批号更换 C 由质控结果决定 4.3 质控物 来源：Precinorm (罗氏正常值质控) Precipath (罗氏病理值质控) 其它适合的质控品 贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。 三级文件 肌酸激酶(CK)测定标准操作程序 文件编号： 版本/状态：A/1 第3页 共3页 生效日期： 准备：直接使用。 质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。 5 上机操作 见GS200全自动生化分析仪操作维护保养程序。 6 参考范围 男性：<170 U/l 女性：<145 U/l 7 性能指标 本法线性范围为2-2300U/L，不准确度允许范围±30%，不精密度CV=2.1%，灵敏度2 U/L。 8 注意事项 8.1 血清Ca2+是Mg2+的竞争抑制剂，加入EDTA可消除Ca2+的影响。血清中存在内源性的抑制剂，表观CK活力随稀释倍数增加而增加，故不宜用盐水稀释。 8.2 红细胞及所有组织中含有腺苷酸激酶（AK），反应产生的ATP导致表观CK活力增加。 8.3 最好用血清标本，肝素血浆也可以，CK活性不稳定，血清保存时易丧失，标本采集后最好将血清冷却到4℃。 8.4血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。 8.5 换算关系式：U/l × 0.0167 = ukat/l 8.6仅应用于体外诊断。 8.7扔弃废物应符合当地的法规。 9抗干扰能力： 9.1标准：回收率在90％－110％之间。 9.2黄疸：黄胆指数达到60时不会有明显干扰。（直接和间接胆红素浓度约为60mg/dl） 9.3溶血：溶血指数达到200时不会有明显干扰。（血红素浓度约为200mg/dl） 9.4脂血：乳糜指数达到1000明显干扰。（甘油三酯浓度约为2000mg/dl） 10 临床意义 肌酸激酶（CK）主要存在骨骼肌和心肌,在脑组织中也有。各种类型进行性肌萎缩时，血清CK活性均可增高。神经因素引起的肌萎缩如脊髓灰白质炎时活力正常，皮肌炎时CK活性可有轻度或中度增高。急性心肌梗死后2～4H就开始增高，在14－24小时达到高峰,可高达正常上限的10～12倍。CK对诊断心肌梗死较AST、LDH的特异性高，但此酶增高持续时间短，3～4天就恢复正常。病毒性心肌炎时也明显升高，对诊断及预后有参考价值。 CK增高还见于脑血管意外、脑膜炎、甲状腺机能低下等患者。还应注意到一些非疾病因素如剧烈运动、各种插管及手术、肌肉注射冬眠灵和抗生素等也可能引起CK活性增高。