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化学发光 发光免疫分析技术 直接化学发光免疫分析 化学发光酶免疫分析 电化学发光免疫分析 化学发光免疫技术是近二十年来发展非常迅速的非放射性免疫技术。 化学发光免疫技术是一项免疫测定技术,继酶免疫分析技术、放射免疫技术、荧光免疫技术之后发展的一项新兴测定技术。 由于这种测定具备很高的特异性和很小的干扰,因此,如同放射免疫分析(RIA)、荧光免疫测定(FIA)等样利用免疫反应的特异性和化发光本身的信号特异性形成了目前所说的化学发光免疫技术。 发光免疫分析技术 直接化学发光免疫分析(CLIA) 化学发光酶免疫分析(CLEIA) 电化学发光免疫分析(ECLIA) 工作原理: 化学发光免疫分析仪是通过检测患者血清从而对人体进行免疫分析的医学检验仪器。 化学发光酶免疫分析(CLEIA)是用待测样本与固相包被在白色不透明微孔板中的抗体结合,再与参与化学反应的标记已知抗体(或抗原)的酶发生免疫反应后,形成固相包被抗体—待测抗原—酶标记抗体复合物,经洗涤后加入底物,酶催化分解底物发光,由光量子检测系统接受,光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大,再把它们传送至计算机数据处理系统,计算出待测物的浓度。 化学发光酶免疫分析 (CLEIA)的酶 辣根过氧化物酶(HRP) 碱性磷酸酶 (ALP) 辣根过氧化物酶(HRP) 反应原理:待测样本与固相包被在白色不透明微孔板中的抗体结合,再与HRP标记的已知抗体(或抗原)发生免疫反应后,形成固相包被抗体—待测抗原—酶标记抗体复合物,经洗涤后加入鲁米诺、H2O2、供氢体(DH2)、化学发光增强剂 底物:1.常用的发光剂为鲁米诺(或其衍生物) 2.参与催化反应的H2O2和DH2 化学发光增强剂:用于增强发光和延长发光时间,从而提高灵敏度 *鲁米诺和H2O2在无HRP催化时也能缓慢自行发光,故配置成两瓶底物试剂 碱性磷酸酶(ALP) 反应原理:待测样本与固相包被在白色不透明微孔板中的抗体结合,再与标记已知抗体(或抗原)的ALP发生免疫反应后,形成固相包被抗体—待测抗原—酶标记抗体复合物,经洗涤后加入金刚烷(AMPPD)、化学发光增强剂,在ALP的作用下AMPPD的磷酸脂基水解得到一个稳定的中间体AMPD,AMPD经分子内电子转移裂解为一分子金刚烷酮和一分子处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子,当其回到基态时则产生470nm的光,可持续几十分钟。 底物:常用的发光剂为金刚烷(AMPPD) 血液流变学 血流变仪的工作原理: 采用锥/板式测量方式,通过一个低惯性的转矩马达对被测试液体施加一个受控应力,驱动轴由一个低阻力磁浮轴承保持在中心位置,它将施加的应力传递到被测液体上,其测试头为锥板式。其测试原理是依据牛顿粘性定理。 * 1920年提出流变的概念:物体产生流动与变形 1948年提出生物流变学(Biorheology):生命现象中的流变学,即血液、淋巴液其他体液、玻璃体,软组织如血管、肌肉、晶体、甚至骨骼,细胞质等均可发生流变。 到1951年提出血液流变学(Hemorheology):研究血液及其有形成分的流动性与形变规律及其相互作用的流变学 一、发展史 血液流变学 * 二、血液流变学研究的内容 1.宏观流变学(Macrohemorheology) 2.血细胞流变学(Cellular hemorheology) 3.分子血液流变学(Molecule hemorheology) 研究全血在各种切变率下的表观粘度及血浆粘度。 从分子水平上研究血液成分的流变特性及其分子 基础,结构和功能之间的相互关系。 研究血液中有形成分的流变学特性。 研究全血在各种切变率下的表观粘度及血浆粘度。 研究血液中有形成分的流变学特性。 * 三、血液的流变学特性 层流(laminar flow)或滞流(viscous flow): 当流体在管中流动时,若其质点始终沿着与管轴平行的方向作直线运动,质点之间没有迁移,互不混合,整个管的流体就如一层一层的同心圆筒在平行地流动。 血液在血管中是分层流动的,故越靠近中央流速越快,反之越慢. 血液中的血细胞在血管中流动时,表现出明显的趋轴性,血细胞处于血管的中央,其周围是血浆层,称为轴流 人体内血液的流动大都属于层流,在血液流动很快或血管很粗的部位(如在主脉中)容易产生湍流。 * 四、血液的流变学基础概念 1.内摩檫力(internal friction):相邻快慢两层之间驱使整体血液流动产生的摩檫力。f=(η·△V / △X )·△S 2.切应力(shear stress):在单位面积上所承受的粘滞力,驱动各层向切线方向形变的力。τ=f/△S 3.切变率(shear rate):层流中单位距离的两个液层的流速之差。g=△V /△X 单位(秒-1 ,s-
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