第22章 超敏反应性疾病及其免疫检测.pptxVIP

临床免疫学检验技术;第二十二章 超敏反应性疾病及其免疫检测;目 录;重点提示;超敏反应（hypersensitivity）：是机体接受某些抗原刺激时，出现生理功能紊乱或组织细胞损伤等异常的适应性免疫应答。 ;Ⅰ-Ⅳ型超敏反应发生机制的比较 ;第一节 Ⅰ型超敏反应;Ⅰ型超敏反应：亦称变态反应（allergy）或过敏反应（anaphylaxis），主要由特异性IgE抗体介导产生，因其发生速度快，常在再次接触相同抗原后数分钟内即出现临床反应，故又称速发型超敏反应（immediate hypersensitivity）。 ;;2 ．激发试验(provocation test)：是模拟???然发病条件，以少量致敏原引起一次较轻的变态反应发作，用以确定变应原的试验。;二、Ⅰ型超敏反应体外检测方法;1．血清总IgE(total IgE，tIgE)检测 （1）检测方法：包括免疫比浊、化学发光免疫试验和酶联免疫吸附试验。 （2）临床意义 ：TIgE升高常见于过敏性疾病 ，当患者有选择性IgA缺乏症，感染、肿瘤和其他情况（输血、川崎病、肾病综合症、肝脏疾病）时也出现血清TIgE升高。单纯TIgE升高不能作为疾病诊断依据，也不能说明患者属于特异质个体；TIgE正常也不能排除变态反应疾病。 ;;2．特异性IgE（specific IgE，sIgE）检测 （1）检测方法：包括放射免疫试验、免疫印迹和荧光酶免疫试验。 放射变应原吸附试验 （radioallergosorbent test，RAST） RAST是目前公认的检测Ⅰ型超敏反应的有效方法之一 。根据标记物不同分为：RAST RIA 、RAST EIA 、RAST FEIA。;免疫印迹 应用免疫印迹检测sIgE时，因为CCD的存在，可能出现交叉反应，影响结果判定。 交叉反应性碳水化合物决定因子（Cross-reactive Carbohydrat Determinant，CCD）：是指变应原分子结构中包含的能与蛋白质结合的寡聚糖侧链，可以诱导机体产生特异性IgE。抗CCD的sIgE不引起过敏反应，但可以造成血清学变应原检测出现假阳性结果。; 荧光酶免疫试验 （fluorescent enzymeimmunoassays，FEIA） 是利用酶标记抗体（抗IgE）与待测样本（血清sIgE）反应，借助酶催化荧光底物，经酶促反应生成稳定且高效的荧光物质，通过测定荧光强度确定待测样本sIgE的含量。;（2）sIgE检测的临床意义 ：sIgE检测可以与变应原皮试和支气管激发试验互为补充，但不能完全代替后两种试验。 （3）sIgE检测的应用评价： ①RAST方法检测效率低（每次只能检测一种变应原）；有放射性核素污染风险；当待测血清中含有相同特异性IgG时可干扰正常结果。②免疫印迹无污染、无需特殊设备、操作简单、能一次性确定多种变应原，故广泛应用。③荧光酶免疫试验的敏感性和特异性均较好，但使用荧光素做标记时，试剂的使用有效期较短。;3. IgG4检测 （1）检测方法：包括放射免疫试验、酶联免疫吸附试验、免疫比浊等。 （2）临床意义 ： ① IgG4异常增高可见于Ⅰ型超敏反应性疾病和IgG4相关性疾病。 ②此外，类风湿关节炎、系统性红斑狼疮等自身免疫病患者血清中亦可出现IgG4水平升高。 ;4．细胞脱颗粒测定 （1）类胰蛋白酶测定：作为肥大细胞活化、脱颗粒的指标。一般采用双抗体夹心ELISA法。 （2）嗜碱性粒细胞脱颗粒测定：该试验阳性不仅能够证实sIgE的存在，而且能够证明sIgE是有功能的，较单纯皮肤试验或sIgE阳性结果更有临床意义。 （3）嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(eosinophil cationic protein，ECP)测定：作为嗜酸性粒细胞活化、脱颗粒的指标。ECP测定包括荧光免疫试验、化学发光免疫试验、酶联免疫吸附试验和放射免疫试验等多种方法。 ; 第二节 Ⅱ型超敏反应 ;Ⅱ型超敏反应：又称为溶细胞型或细胞毒型超敏反应，特点是由IgG或IgM类抗体与靶细胞表面相应抗原结合后，在补体、吞噬细胞和NK细胞参与下，引起的以细胞溶解或组织损伤为主的病理性免疫反应，发作较快。;;2．凝聚胺法： 原理： 低离子介质——降低溶液的离子强度——促进不完全抗体与红细胞抗原结合； 高价阳离子多聚物（凝聚胺）——中和红细胞表面的负电荷——使IgG型抗体直接凝集红细胞。 加入中和液——由凝聚胺引起的非特异性凝集——分散；由抗体介导的特异性凝集——不分散。 结果判定： 凝集块在短时间（1分钟）内分散——判断为阴性； 形成不同强度的凝集块——判断为阳性。 ; 3．酶介质法：原理是IgG型不完全抗体与红细胞膜上相应抗原结合不能形成肉眼可见的凝集。加入酶介质后，红细胞膜表面的唾液酸糖肽被破坏，细胞膜表面