直接计数法及酵母菌的测定-食品微生物.pptVIP

实验项目十一 直接计数法及酵母菌的测定 Ppt出自江苏食品学院食品与营养工程学院 -----食检112班 杨双茹(11) 吴海珍(12) 王婷(09) 1.实验的目的要求: 了解血球计数板测定微生物数量的原理. 了解血球计数板的结构，学习并掌握利用血球计数板进行酵母菌记数的方法，包括样品的点样、菌数计数的方法与计算。 2.实验原理 微生物常用的计数方法有两种，即直接计数法和间接计数法。前者利用 血球计数板 在显微镜下直接计数，能立即得到数值。后者是在平板上长成菌落后再计数，反应较真实，但费时太长。 3.实验器材 菌种：酵母菌液 仪器：显微镜，血球计数板、盖玻片（22mm*22mm）、吸水纸、计数器、滴管、擦镜纸等。 4.酵母细胞数测定具体的操作方法 血球计数板的构造图示 酵母菌数量的测定 取洁净的血球计数板一块，在技术室上盖一块盖玻片。 摇匀酵母菌液，用滴管滴在计数板中间两侧的沟槽内滴一滴，使渗入计数室，勿产生气泡，保证计数板干净后，然后盖上盖玻片（勿产生气泡） 静置五分钟，先用低倍镜找到计数室再转换高倍镜观察计数 计数时用16中格的计数板，要按对角线方位，取左上、左下、右上、右下的4个中格（即100小格）的酵母菌数。如果是25中格计数板。除数上述四格外，还需数中央1中格的酵母菌数（即80小格）。由于菌体在计数室中处于不同的空间位置，要在不同的焦距下才能看到，因而观察时必须不断调节微调螺旋，方能数到全部菌体，防止遗漏。如菌体位于中格的双线上，计数时则数上不数下，数左不数右，以减少误差 凡酵母菌的芽体达到细胞大小一半时，可作为两个菌体计算。 血球计数板用后，应用水洗干净切勿洗刷，一面损坏网格刻度，洗净后晾干即可。 实验报告填入下列表格 5.思考题 根据你的体会，说明用血细胞计数板计数的误差主要来自哪些方面？应如何尽量减少？ * * 实验方向分为 1.目的要求 2.实验原理 3.实验器材 4.操作方法及报告 5.思考题 5 4 3 2 平均值 总菌数 稀释倍数 每个大方格均数 计数次数 第二次 第一次 1