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第三章 细胞工程（cell engineering） 主讲人：黄 循 吟 一、概述 问题：1、什么是细胞？什么是细胞工程？ 2、发展简史如何？ 3、细胞工程的基本技术是什么？ 1、什么是细胞？什么是细胞工程？ 细胞：是由细胞质膜包裹着的细胞质和核或核带组成的，能自我繁殖的结构物，是生物体的基本结构单位和功能单位，是生命孕育的起点，是生物体的基本组成单位。 Cell engineering:根据生物学和工程学的原理，在细胞水平上定向改造细胞的遗传物质，培育具有新性状的生物个体或细胞群体，并利用它们为人类生产各类药品和其他产品以及提供服务的技术体系。 2、发展简史如何？ 1）1838（最早）马勒，在脊椎动物的肿瘤细胞中观察到多核现象 2）1849-1858年 科学家们在肺组织和各种正常组织及发尖和坏死部位都发现了多核现象。 3）1859年，A.巴里解开了这个谜团，他认为“多核现象”是由“单个细胞融合”而成的。 4）到了1907年哈林发现了细胞培养的方法。使人们能应用这种细胞培养技术。 5）1965年哈里斯和奥金斯在前人的基础上在细胞融合中所做的贡献 。 6）直到1960年，英国诺丁汉大学科金教授创造性地应用酶解的方法，才首次成功地从番茄幼苗的根部制备到大量的原生原体。在此基础上，1972年美国的卡尔森等人用 NaBO3作为融合的诱导剂，将来自不同种的两个烟草原生质体进行融合，获得世界上第一个体细胞杂种植株。此后，分别以凯乐、高国楠和乔默尔曼等为首的三个科学家小组，从不同方面改良和发展了植物体细胞融合技术。目前常用的植物细胞融合技术，有高国楠建立的使用化学融合剂PEG（聚乙二醇）的融合技术（1974），森达和乔默尔曼创立和发展的电融合技术，以及斯维格（1978）将电融合体系培养技术。近年来，在植物细胞融合研究方面的突出进展是建立了单对细胞融合体系培养技术，并基本上解决了融合细胞的选择问题。现在，植物原生质体及其应用的研究已成为植物细胞工程中最活跃的研究领域之一。 3、细胞工程的基本技术是什么？ 细胞的培养技术：是将生物体的某一部分组织取出一小块，在体外进行表面消毒处理后，使之分散成单个游离的细胞，并放置在人工配制的培养基中进行培养，使之生长分裂的技术。 由于生物体的一种组织，往往包含有两种以上的细胞，如叶片组织至少年犯含有叶肉细胞，维菅束鞘细胞和表皮细胞在培养过程中不易分开，所以细胞培养有时叫组织培养或统称为细胞与组织培养。 细胞的培养技术的意义 细胞的培养技术不仅是细胞工程的一项基本技术，也是生物工程的一项基础技术，掌握了细胞的培养技术，就可以利用细胞的遗传稳定性和变异性为细胞生物学的基础理论研究和生物工程的生产应用提供用力的手段。 例：1、研究者可以根据不同的研究内容和目的，十分方便地在细胞培养基中添加或减少某些特殊的物质，如激素或生长因子等，这样就可以确切了解这些因子对细胞生长发育的效应及其生理生化本质； 细胞的培养技术的意义 2、可以获得比较均一的细胞群体，为基因工程和细胞工程提供遗传的对象和受体获得变异细胞株，以应用于遗传学和遗传工程研究、代谢与发育过程及其调节的研究，获得有用价值的或具有新型生物或细胞系； 3、建立种质资源库，保存具有重要价值的或濒临灭绝的生物种类； 4、生产各种有用的化合物（药物）； 5、进行无性系快速繁殖等。  细胞融合技术（也称细胞杂交技术）：细胞融合技术是60年代创立的。它是在一定条件下，使不同来源的两个或多个细胞合为一个细胞并增殖或形成新的生物体的技术。 动物细胞无细胞壁，可直接诱导融合； 植物细胞进行融合时，必须先除去细胞壁。 意义：动物细胞融合技术的成功，导致了淋巴细胞 杂交瘤技术的出现，植物融合技术的成功不仅打破了杂交育种的亲和性障碍，而且为实现“超远缘杂交”提供了可能，因此在植物育种上有重大工的意义。 二、动物细胞工程 问题：1、什么是动物细胞工程？研究的内容是什么？ 2、动物细胞工程技层次如何？ 3、动物细胞工程有何理论与实践意义？ 4、动物细胞培养有何特征？ 1、什么是动物细胞工程？研究的内容是什么？ 动物细胞工程：是根据细胞生物学及工程学的原理，利用生物技术对动物细胞进行遗传操作，定向改造动物的遗传性，创造新的物种，以及从动物组织中分离有特定的功能的细胞并通过工程化在体外条件下使之快速繁殖，产生特定生物产品的工艺。 内容： 人工受精（体外受精） 胚胎移植 核移植 哺乳动物孤雌生殖 双胞及嵌合体 性别选择 胚胎分割及保存 细胞融合 细胞大规模培养 动物细胞大规模培养 动物细胞反应动力学 动物细胞反应器 主要研究内容。 2、动物细胞工程技层次如何？ 遗传操作可