蛋白质分离技术电泳讲义.pptVIP

蛋白质分离技术电泳;概 述;琼脂糖凝胶; 琼脂糖 半乳糖及其衍生物构成的中性物质，不带电荷; 琼脂糖链依分子内和分子间氢键及其它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束，构成大网孔型凝胶。 ;;; 琼脂糖凝胶的特点;（二）缺点 1.机械强度差，易破碎，浓度不能太低。 2.易被细菌污染，不易保存，临用前配制。 3.琼脂糖支持层上的区带易于扩散，电泳后必须立即固定染色。 4.与PAGE相比，分子筛作用小，区带少。 ;应 用;琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白;(一)血清脂蛋白(lipoprotein)的组成 ApoA ApoB 蛋白质：即载脂蛋白 ApoC ApoD ApoE 甘油三酯 （TG） 脂类 磷脂 （PL） 游离胆固醇 （FC） 胆固醇酯 （CE） 少量糖 ;;;2. 按超速离心法分 乳糜微粒(chylomicron,CM) ( 0.96 ) 极低密度脂蛋白 (0.96?1.006) (very low density lipoprotein, VLDL) 中间密度脂蛋白 (1.006?1.019) (intermediate density lipoprotein, IDL) ? 低密度脂蛋白LDL(1.019?1.063) (low density lipoprotein, LDL) 高密度脂蛋白HDL(1.063?1.21) (high density lipoprotein, HDL) ? ;;;（三）结 构 特 征; pH 8.6 pI ，各种脂蛋白均带负电，电泳时由负极到正极；VLDL为圆形，受阻力小，LDL形态不规则，受阻力大，所以VLDL跑在前。; 加样槽 β 前 β α;临床应用：高脂蛋白血症的分型 CM β 前β α 正常 Ⅰ型 Ⅱa型 Ⅱb型 Ⅲ型 Ⅳ型 Ⅴ型;操作;玻璃片;;预染色的标本;;;;;;;;正常参考值（百分比） α-脂蛋白 30-40% 前β-脂蛋白 15% β-脂蛋白 55% ;名词解释 1.迁移率 2.电渗 3.电泳 问答题 1.影响电泳迁移率的因素有哪些？ 2.试述琼脂糖凝胶电泳分离脂蛋白的原理。 ;参 考 书 目