中国科大物化实验2 分光光度法测溴酚蓝的电离平衡常数报告.pdfVIP

实验二 分光光度法测溴酚蓝的电离平衡常数 P张镇 【摘要】 本实验利用分光光度计测量溴酚蓝（BPB）的最大吸收波长，用缓冲溶液调 节溶液酸度分析pH对BPB 电离程度的影响，并通过分光光度法测量弱电解质BPB 的电离平衡常数。 【关键词】 溴酚蓝 分光光度法 电离平衡常数 【前言】 由于分子结构不同，不同的物质对光的吸收选择性不同。吸收光谱上吸收峰的位置及形 状、在某一波长范围内的吸收峰的数目和峰高都与物质的特性有关。分光光度法是根据物质 对光的选择性吸收的特性而建立的，这一特性不仅是研究物质内部结构的基础，也是定性分 性、定量分析的基础。 本实验用分光光度法测定弱电解质溴酚蓝的电离平衡常数。溴酚蓝是一种酸碱指示剂， 本身带有颜色且在有机溶剂中电离度很小，所以用一般的化学分析法或其他物理化学方法很 难测定其电离平衡常数，而分光光度法可以利用不同波长对其组分的不同吸收来确定体系中 组分的含量，从而求算溴酚蓝的电离平衡常数。 附： 溴酚蓝的性质： 【分子式】C H Br O S 19 10 4 5 【名称】3’,5,5’-四溴苯酚磺酰酞 【英文名称】Bromophenolblue;Albutest 【相对分子量或原子量】670.0 【性状】从乙酸及丙酮混合液中析出者为长六角形棱柱状结晶。 【溶解情况】微溶于水，易溶于甲醇、乙醇和苯，可自由溶于氢氧化钠溶液， 同时形成溴酚蓝钠盐水溶液。 pH pH=3.0 pH=4.6 【用途】 指示剂， 时呈黄色， 时呈蓝紫色。 【制备或来源】将苯酚磺酰酞悬浮于醋酸中，然后徐徐加入溴，并使溴过量， 50 在搅拌下，于 ℃进行反应而得。 279 210 【其他性质】溴酚蓝分解温度 ℃，在 ℃绿色升华物退色为橙色。溴酚蓝 279 为无色到淡红色结晶或淡黄到淡棕色粉末。其熔点为 ℃ （分解），溶于醇； 在稀碱液及氨溶液中呈蓝色，微溶于水及醚溶液带黄色。溴酚蓝可用作酸碱指示 pH3.0( )--4.6( ) 剂， 黄 紫 ，非水溶液滴定指示剂，蛋白电泳染色等。 【实验部分】 一、实验原理 波长为λ的单色光通过任何均匀而透明的介质时，由于物质对光的吸收作用而使透射光  的强度（I）比入射光的强度（I ）要弱，其减弱的程度与所用的波长（ ）有关。又因分子 0 结构不相同的物质，对光的吸收有选择性，因此不同的物质在吸收光谱上所出现的吸收峰的 位置及其形状，以及在某一波长范围内的吸收峰的数目和峰高都与物质的特性有关。分光光 度法是根据物质对光的选择性吸收的特性而建立的，这一特性不仅是研究物质内部结构的基 础，也是定性分性、定量分析的基础。 根据贝尔—郎比定律，溶液对于单色光的吸收，遵守下列关系式： I 0 Dlg KlC (6－1) I 式中，D－消光（或光密度）； I/I －透光率； 0 K－摩尔消光系数，它是溶液的特性常数； l－被测溶液的厚度（即吸收槽的长度）； C－溶液浓度。 在分光光度分析中，将每一种单色光，分别、 依次地通过某一溶液，测定溶液对每一种光波的  消光。以消光（D）对波长（ ）作图，就可以 得到该物质的分光光度曲线，或吸收光谱曲线， 如图6－1所示。由图可以看出，对应于某一 长有着一个最大的