丹皮酚的提取.docVIP

实验五 丹皮酚的提取、分离和制剂鉴别 牡丹皮为毛茛科植物牡丹Paeonia suffruticosa Andr. 的干燥根皮。本品具有清热凉血，活血化瘀的作用，用于温毒发斑，吐血，夜热早凉，无汗骨蒸，经闭痛经，肿痛疮毒，跌打损伤等症。其主要成分有：丹皮酚（含量1.9%～2%）、牡丹酚甙（丹皮酚甙）、牡丹酚原甙（丹皮酚原甙）（含量5%～6%）、牡丹酚新甙、芍药甙。尚含挥发油约0.15%～0.4%及植物甾醇等。除此外，含丹皮酚的植物还有矮牡丹Paeonia suffruticosa Andr. Var Spontanea Rehd的根皮，紫斑牡丹P . papaveracea Andr.的根皮，黄丹皮P . potanini Kom，四川牡丹P . szechuanica Fang，徐长卿Cynanchum pariculatum(bge) kitag.。丹皮酚主要有镇静、催眠、镇痛、抗血栓形成及降压、抗菌、消炎的作用。 一、丹皮中主要成分的物理性质 1、丹皮酚（paeonol）：C9H10O3，白色针状结晶，mp 49.5℃～50.5℃，稍溶于水，具有挥发性，能随水蒸气蒸馏，能溶于乙醇、乙醚、丙酮、氯仿、苯等。UVλmaxEtOHnm（lgε）：291（4.01），274（4.17），316（3.84 2、丹皮酚甙（paeonoside）：C15H20O8，无色柱状结晶（乙醇），mp81℃～82℃，[α]20为-39.33°(c=6.0，H2O)，可溶于水、乙醇、丙酮、乙酸乙 3、丹皮酚原甙（paeonolide）：C20H28O12，无色柱状结晶（乙醇—乙酸乙酯），mp157℃～158℃，[α]20为18.20°（c=0.36，H2O），可溶于水、乙醇、丙酮、乙酸乙 二、目的要求 1、掌握用水蒸气蒸馏法提取丹皮酚的方法。 2、掌握丹皮酚的色谱检识和定性检识。 3、熟悉杞菊地黄丸中主要成分丹皮酚的鉴别方法。 三、基本原理 1、丹皮酚具有挥发性，可随水蒸气蒸馏，又因在冷水中难溶，故放冷后析出结晶。 2、杞菊地黄丸中含有8味中药，牡丹皮中的丹皮酚为有效成分之一，利用丹皮酚可溶于乙醚的性质，用乙醚提取，并将醚提取液用酚类的显色反应检识，与丹皮药材提取液和丹皮酚标准品对照鉴别。 四、操作 （一）丹皮酚的提取分离 取市售丹皮①150g，粉碎，加入700ml蒸馏水、10ml乙醇②和40克氯化钠③，浸润后，进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液约300ml，将蒸馏液放冷，静置过夜，有白色针状结晶析出，滤取结晶，干燥，称重。如结晶不纯，可加入95%乙醇至全部溶解（约为粗晶的15倍），抽滤，滤液中加入4倍量的蒸馏水，使溶液呈乳白色，静置后则有大量白色针状结晶析出，若在提取过程中得不到白色结晶，只有油珠状物质沉出，可在蒸馏液中加入少量晶种，磨擦瓶壁后，即有较大量的丹皮酚结晶析出。也可用乙醚萃取蒸馏几次，合并萃取液后，加无水硫酸钠脱水，回收乙醚至少量，放置析晶，抽滤，结晶用少量水洗2～3次，置干燥器中干燥后称重。 （二）丹皮酚的鉴定 1、显色反应 三氯化铁反应 取丹皮酚结晶少许，滴加5%三氯化铁醇溶液，观察现象。 与浓硝酸反应 取丹皮酚结晶少许，滴加浓硝酸数滴，观察现象。 2、薄层色谱鉴别 薄层板：硅胶G-CMC-Na板。 点 样：丹皮酚供试品和对照品的乙醇溶液。 展开剂：环已烷—乙酸乙酯（3:1）。 展开方式：上行展开，展距10cm。 显 色：喷以盐酸酸化的5%三氯化铁醇溶液，热风吹至斑点显色清晰。 观察记录：记录图谱及斑点颜色。 五、附注 ①丹皮因产地、采收季节的不同，丹皮酚含量差异较大，春秋季节采收含量高，以四川产的含量较高，实验时可以根据含量加减提取的药材量。 ②丹皮酚易溶于热水而难溶于冷水，若采用一般装置，由于初馏液中的丹皮酚浓度过大，遇冷易析出结晶，固着于冷凝管内壁，加入乙醇可把固着于冷凝管内壁的丹皮酚溶解而流入接收瓶中。 ③加入氯化钠可明显提高蒸馏速度，缩短提取时间。 六、思考题 1、丹皮酚还可用什么方法提取分离？ 2、水蒸气蒸馏法适用于提取什么样的成分？操作中应注意哪些问题？ 3、如何利用原药材鉴定成药中的某一成分？