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动物细胞融合和单克隆抗体终极浓缩版.ppt 29页

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? ? ? ? 再分化 ? 植物细胞杂交技术利用什么原理? 用什么方法可以诱导植物细胞融合? 一、原理: 细胞膜具有流动性 细胞的全能性 二、诱导方式: 物理法、化学法 植物细胞杂交技术有什么用途? 三、用途: 获得杂种植株 2.过程: 1、动物细胞融合的基本原理是什么? 2、动物细胞融合的诱导方式是什么?与植物细胞融合的诱导方式有什么不同? 不同DNA的两个细胞 融合 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 灭活的病毒 ? 这是什么? ? ? 用灭活的病毒诱导动物细胞融合的过程 2.过程: ⑴.原理: 1、动物细胞融合的基本原理是什么? 2、动物细胞融合的诱导方式是什么?与植物细胞融合的诱导方式有什么不同? 与植物原生质体融合的基本原理相同,即细胞膜的流动性。 ⑵.诱导方式: 物理法: 电激、振动、离心 化学法: 聚乙二醇(PEG) 生物法: 灭活的病毒 例如:仙台病毒 打破生殖隔离,使远缘杂交成为可能; 广泛应用多个学科领域; 重要用途:制备单克隆抗体。 3.意义和应用: 动物细胞融合过程和植物体细胞杂交有何不同? 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 细胞膜的流动性 细胞的全能性 细胞膜的流动性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 物理(离心、振荡、电刺激) 化学(聚乙二醇) 物理、化学方法(同左) 灭活的病毒 获得杂种植株 ? ? ? ? 制备单克隆抗体 三、单克隆抗体 1、抗体是由何种细胞产生的? 浆细胞(效应B细胞) 2、抗体是如何产生的? B淋巴细胞 抗原 增殖分化成浆细胞 3、一种B淋巴细胞能产生几种抗体? 一种 1、传统的方法得到的抗体具有什么特点? 特异性差、产量和纯度都很低。 三、单克隆抗体McAb 1.概念:   由单个B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点:   特异性强、灵敏度高 1、在体外培养的条件下,一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖? 不可能 2、我们学过的什么细胞具有这样的能力? 癌细胞 3、有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力? 细胞融合 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞(癌细胞)能无限增殖 杂种细胞 动物细胞培养技术 2、实验原理: 动物细胞融合 单克隆抗体 既能产生特异性抗体,又能大量繁殖 播放科学家的单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选,继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 注意观察细胞的种类 诱导融合 选择培养基 筛选,继续培养 克隆能产生抗体的阳性细胞 体外培养否或小鼠腹腔内增殖 动物细胞融合 动物细胞培养 二、单克隆抗体 2、单克隆抗体制备过程----流程图 给小鼠注射特定的抗原蛋白 B淋巴细胞(免疫) 骨髓瘤细胞 杂交细胞 杂交细胞( B-瘤细胞) 单克隆抗体 杂交瘤细胞 瘤-瘤细胞 B-瘤细胞 B-B细胞 2、单克隆抗体制备过程 二、单克隆抗体 (1)什么是免疫的小鼠?怎样对小鼠进行免疫? (2)图中的B淋巴细胞有何功能?骨髓瘤细胞有何功能?杂交瘤细胞有何特点? (3)怎样才能将B细胞与骨髓瘤细胞融合? (4)融合后可能有几种类型的细胞? (5) 两次筛选的目的是什么? (6) 培养杂交瘤细胞的方式有哪两种? (7)制备过程中应用哪些细胞工程技术手段? 四、单克隆抗体的应用 请同学们根据自己所收集的资料,谈谈单克隆抗体的应用。 1可用于作为诊断试剂:有准确,高效,快速的优点 2可用于疾病治疗 3可用于运载药物(作为运载对应疾病的药物的 “生物导弹“。)    “生物导弹”=单克隆抗体+药物 细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合 浆 筛选 瘤细胞 杂交 细胞培养 选出能产生特定抗体的细胞群继续培养 体外培养 体内培养 从培养液或小鼠腹水中取出 单克隆抗体 本节小结 两个过程 动物细胞融合过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法 一个新细胞 一个优势 ——灭活病毒 ——杂交瘤细胞 ——单克隆抗体特异性强、灵敏度高 的优势. 1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较, 在动物细胞融合中有特殊性的是( ) A、融合的原理 B、融合的优点 C、融合的诱导手段 D、融合的过程 2、动物细胞融合的目的中最重要的是( ) A

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