视黄酸对斑马鱼胚胎发育的影响.pdfVIP

维普资讯 安徼大学学报 (自然科学版)JournalofAnhuiUniver~tyNaturalSciet,~Edlt~onNo．‘1994 一 j 视黄酸对斑马鱼胚胎发育的影响 (安徽薅笙勃勃系系各各葩-K00~s) 0(=)、、ff5L丫 摘 要 作者首谯通过 lkdu--aml--Bxdu法标记处于s期细胞棱苷系列实验表明，枧黄 艘对斑马鱼早勰胚胎的中枢神经系统影响较大．主要表现为由前脑缺揖而引起的小头畸形 无跟或冠 脏，但后陆及脊髓部分 原蝓厦射弧仍存在 而对尾芽只作用于璜端生长区。另 外，利用低浓度的枧黄艘还诱导出了过早出现的爪蟾前肢驶火鲑鱼晚期尾芽旺E纳腹培．说明 枧黄艘对软骨的发生f滩度不同而有促进与抑制两方面的忭用。 腊 区 中图分类号Ql32．‘ 艟日糖墨叉由 视黄酸 (RetlnolcacidRA)是维生索A具有生物洲 ：的一剃一物质，它对于旺胎发育、 模式的建立、再生组织分化．肿痛细胞生长方面的影响较大。如RA可影响某些脊椎动物 肢芽前后轴 (anterior--posterioraxis)方向的发育 (如指或爪数的增多或减少)I爪蟾胚近 远端 (Pr“jm —diga【n axis)方向的生长 (如小头畸形、短尾等)}对腔肠动物贝螅 (Hydrac~inia)可使其触手增多、水螅体变短而出芽密度增大．另外，RA还可使软骨细胞 转化成问充质、或神经细胞痹转化为神经元、或纤维细胞转化皮脂肪细胞等。其中大部 分脊椎动物是以鸡和两栖类为实验材料。 本文着重在RA对鱼肛中枢神经系统及尾芽发育影响方面做—些初步探索。 斑马鱼 (Btachydaor 。)由于有卵透明、胚胎发育快、心脏、体节清晰等优点，所 以整个发育过程可在解剖镜下进行观察．因此是_岍究脊椎动物发育模式不可多得的好材 料。另外，作者还选用了另外两种动物；火鲑鱼 (Rresan~ ，Hyp}le＆蛐ryconflamn【em)． 及爪蟾 (Xen~puslaevig)作为术实验的补充及对比材料． 1 材 料 与 方 法 1．1 动物的来源及饲养 斑马鱼及火鲑鱼的成体按其性别分离饲养于 26C的水族箱内，定时喂以鱼饵外加咸 水丰年虫 (~ mien，SaUna)．直到雌雄体强壮到足 产健康卵后 ，把一雌三雄放在装有 产孵盒的水族箱内。次目清晨6 7对声卵 斑甄峨的薅兼雌羲约产q∞哪 o0个卵，吠 鲑鱼则为 50~300个卵，卵的直径均为hran。 忧稿 日期 1993—12一O *奉实验为作者在德国海登堡太学进修时在 A．Miiller教授指导下昕敏的工作． 维普资讯 第 3期 ·87· 1．2 抗体及Brdu来源 Brdu及初级抗体购于Becton--Dicldnson，TulIas~r．8一l2，Postfach101629。6900Heide1． bern，德国。 次级抗体Anti--MouseIgG，FITC购于Milers，BayerDiagnoseties，Steinerstr，15，Pcst- fach701360。8000M~nchen70，德国。 1．3 方 法 Brdu--Anti--Brdu免疫细胞化学法能够清楚地显示出在某一指定的时刻处于S期的 细胞核。因为Brdu可在合成新的核苷酸链过程中取代胸嘧啶。结合上Brdu的核苷酸片断 可用Ant~--Brdu韧级抗体识别．再通过连接异硫氰酸荧光素FITC的次级抗体 (Brdu-- Anti--Mouseigo，眦 )最后可在荧光显徽镜下观察其结果。(Brdu为潜在的致癌剂，操 作对应带上防护手套)。 ． (1)在解剖镜下删眼