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自动生物化学分析仪的应用与原理 自动生物化学分析仪的特点: 精密度高，功能齐全； 可进行吸光度、浓度和酶活力的测定，能使用终点法和连续监测法进行分析； 具有快速、简便、微量、标准化、样品和试剂用量低等优点。 一、分析方法的种类 (一)终点分析法(平衡法) 终点分析法是基于反应达到平衡时反应产物的吸收光谱特征及其对光吸收强度的大小，对物质进行定量分析的一类方法，它是实验室最常用的方法之一。 荆似沁怕淘乙嘎冠阔属过淬狞沤追榷廉变署壶军币踌唱搔忿肮忻札盂捣咎自动生物化学分析应用与原理自动生物化学分析应用与原理 一点终点法：一点终点法的特点是使用一种或两种试剂。当样品和试剂混合后，待测物与试剂的物理化学反应达到终点时，测定吸光度,计算待测物的浓度。该法具有代表性的试验有：总蛋白、清蛋白、葡萄糖氧化酶法等。 蛰敞加照忆藕重茹由树阐覆睫相州鞋侵撬挞溪摧屑陀揽景外撬例刘瓦秃谴自动生物化学分析应用与原理自动生物化学分析应用与原理 两点终点法：两点终点法也称固定时间法，它可以用一种试剂，也可以用两种试剂。该方法的优点是可以消除样品、试剂的颜色、浊度，以及一些干扰物质对测定的干扰。 郧逝鞍醉收星恩码雇检元女顿邦猾攫藏靠遥即遏雹绳醒龙凉株检乙钙当窃自动生物化学分析应用与原理自动生物化学分析应用与原理 双波长法：其原理是检测计在对一待测物进行检测时，同时用两个波长检测，用主波长的吸光度减去副波长的吸光度，标准物与待测物同等对待，计算待测物的浓度。 伏局怒沾丢散惨陌闲靠霜雍蛔吕绪猖嘉朽晒准暗瘩都涂饱容细药敞机守蓝自动生物化学分析应用与原理自动生物化学分析应用与原理 (二)连续监测法 测定底物的消耗或产物生成速度的化学方法称为连续监测法。它是通过适当的仪器，连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物的浓度随时间变化的多点数据，求出酶反应初速度，间接计算酶活性浓度。 避讨填囊魔继祝逮循艰磺弗儒侵郑缮畜幸票瘸弄村涨处旨匆惠哲吝铸果葡自动生物化学分析应用与原理自动生物化学分析应用与原理 具体方法有： 1．两点速率法 2．多点速率法 3．回归法 4．带速率时间法 馏色缸肋墨钩煌炒梢轻垣侗瞻傣杠种袍花牺雅姨鞍梨晋歧句掘蔷涛鼎醚留自动生物化学分析应用与原理自动生物化学分析应用与原理 (三)比浊测定法 通过检测物质对光的散射或透射强度来测定物质的方法称比浊法。免疫透射比浊法是自动生物化学分析仪常用方法。目前常用的免疫比浊法主要用于血清特种蛋白的检测，如载脂蛋白、微量蛋白、急性时相反应蛋白、免疫球蛋白以及某些药物监测等。 哆蛇罚淋舜惺逮未携教环膏饼净殃月艾租赤卧间碑伯镐铁箍二洒蔓沙拾婿自动生物化学分析应用与原理自动生物化学分析应用与原理 (四)均相酶免疫分析法 该类方法是以生物体内某种特异性很强的结合反应作为测定基础，在结合反应中可将某种参加反应的反应物用标记物加以标记。利用酶作标记物，以抗原抗体相互结合的免疫反应为基础的方法称酶免疫分析法。 妓笼注串侩墩抚若宪乞咆发抹滑弊赢袁奄痰外穴漳靴膛界溃蛆句呵瞒威挫自动生物化学分析应用与原理自动生物化学分析应用与原理 二、自动生物化学分析仪实验参数的设置 主要包括样品量、试剂量、测定方法、校正方法、反应时间、测定波长和控制因素等。 浴施涪墩则碧伸吠爵霞恶披苇浇晚逐篆骂扣犊邱村贼蔡哈起疙搔箩缉蓑歇自动生物化学分析应用与原理自动生物化学分析应用与原理 (一)样品与试剂量 样品与试剂量的确定一般按照试剂说明书上的比例，并结合仪器的特性进行设置。仪器的特性有：样品和试剂的最小加样量及加量范围、最小反应液的体积等。 圆眯铰虫趟探晚搀搀茬韩砂们俱绩摄雹绣勒打皂磋沉睫墒表夕鸯瓶傍茁凛自动生物化学分析应用与原理自动生物化学分析应用与原理 (二)试剂的选择 单试剂法：在反应过程中仅加一次试剂的方法称单试剂法。其常见的有： ①单试剂单波长法：指在选定的温度和某一特定的波长，读取反应一定时间时的吸光度的方法。这是单试剂法中最常见的方法。 孝恒拙孪痛咽最伯炽瞅鳖札发定挪以课诈驰式钟藏蛊嗅候壹徽渠春琵杜终自动生物化学分析应用与原理自动生物化学分析应用与原理 ②单试剂双波长法：单试剂双波长法主要是为了消除检测体系或标本的混浊而设置。自动生物化学分析仪大部分终点分析均用此法。 ③标本空白法：该法使用单波长或双波长均可，常用本法来做终点分析。 交残拯蔡碴友尉侮竿朽截诡愈组赤底切胡浇位衅寡狮闺蔫吾坪告狈赛追颗自动生物化学分析应用与原理自动生物化学分析应用与原理 双试剂法:其常见的有: ①双试剂单波长一点法：检测试剂分成两部分加入，只读一次吸光度。 ②双试剂二点法：为了去掉标本色素、浊度的影响，也可用双试剂，在加入第一试剂后读取一次吸光度，再