第九章 微生物的遗传变异与菌种选育 第一节 基因突变和诱变育种 中国微生物菌种保藏委员会(CCCCM) 中国典型培养物保藏中心(CCTCC) 美国典型菌种保藏中心(ATCC)等 使微生物处于冷冻状态,代谢作用停止以达到保藏目的。 微生物细胞对低温敏感,可用速冻、快速降温和添加各种保护剂等手段。 液氮保藏或-70℃低温保藏。 用普通冰箱冷冻保存菌种的效果往往远低于低温冰箱,应注意经常检查保藏物的存活情况,随时转种。 水分对各种生化反应和一切生命活动至关重要,因此,干燥,尤其是深度干燥是微生物保藏技术中另一项经常采用的手段。 沙土管保存和冷冻真空干燥保藏是常用的微生物干燥保藏技术。 沙土管保存 主要适用于产芽孢或分生孢子的细菌,如芽孢杆菌、放线菌等。菌种培养长出大量的芽孢或孢子,洗下孢子制备孢子悬液,加入无菌的沙土试管中,减压干燥,抽干水分,最后用石蜡、胶塞等封闭管口,置冰箱保存。芽孢可常温保存。 此法简便易行,并可以将微生物保藏较长时间。 冷冻真空干燥保藏 将加有保护剂的样品预先冷冻,抽真空除水分,干燥的样品可在真空或惰性气体密闭环境中置低温保存,使微生物处于干燥、缺氧及低温、休眠状态,可达到长期保藏目的。 此法是目前使用最普遍,也是最重要的微生物保藏方法,为大多数专业的菌种保藏机构均采用。 第三步,检出缺陷型 夹层培养法(
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