家畜配子和胚胎生物工程.pptVIP

胚胎细胞毒性分析 间接免疫荧光分析法 囊胚形成抑制法 免疫亲和柱层析法 H-Y抗血清直接输入法 免疫磁珠技术 培养腔前卵泡培养基主要有MEM,GMEM,TCMl99和 Wavmouth MB752/l 培养基等。 培养基中添加血清、成熟分裂抑制剂、促性腺激素、类 固醇激素和生长因子等。 培养方法有微滴法、琼脂包埋培养法、胶原蛋白铺层培 养法(二维法)和胶原蛋白包埋培养法(三维法)。 分离培养腔前卵泡研究已在小鼠、仓鼠、大鼠、兔、猫、 猪和牛均有报道，并以小鼠和牛研究较多，但仅在 小鼠获得后代。 精子的预处理 浮游程序（swim up） 玻璃棉过滤程序 BSA/Percoll 密度梯度 透明质酸的作用 精子洗涤 精子浓度 精子活力的提高 咖啡因 PHE 腺苷及其类似物 血小板激活因子 谷胱甘肽 己酮可可碱和茶碱 体外获能处理方法 肝素处理 高离子强度液处理 高pH 值处理 黄嘌呤 咖啡因处理 牛卵泡液 猪卵泡液 子宫液、输卵管液 精子活力激动剂 钙离子载体处理 调整获能精子浓度，制成小滴，覆盖石蜡油，经培养30～ 60min。将体外培养成熟的卵母细胞加入与之共孵育。精 卵共孵育时间与受精体系有关。洗去多余精子和卵丘 细胞，转移至受精卵培养液中继续培养。受精卵标志 是雌、雄原核，排出第二极体，或发育到卵裂期胚胎。 显微受精(micro fertilization)。它是