蛋白质一级结构及测定.pptVIP

蛋白质化学测序 ③Cleland试剂的还原作用 Cleland′s指出二硫赤苏糖醇(dithioerythriotol)及二硫苏糖醇(dithiothriotol)在氧化还原能力上是比较强的试剂，只要0.01摩尔就能使蛋白质的-S-S-还原，反应基本与疏基乙醇相似，且在许多球蛋白反应中，可以不用变性剂。 (二)封闭N—末端的测定 1.乙酰化N—末端：CH3CO-NH- 肼解 N—末端乙酰基形成乙酰肼，与DNS—Cl作用，形成N—乙酰—N′—丹磺酰肼，经乙醚抽提后，层折鉴定。 从编码蛋白质的核酸序列推测氨基酸序列★ 测定蛋白质序列和测定核苷酸序列的技术是互补的。获取基因后，DNA测序要比蛋白质测序快得多，现在大多数蛋白质是直接通过这种方法来获得序列的； 十二烷基磺酸钠(  实际是测定几个不同浓度的渗透压，以  对C作图，并外推到蛋白质浓度为0时，得截距，即 ，代入上式 六、根据氨基酸残基数估算分子量 氨基酸的平均分子量为138，由于小分子量氨基酸较多，故以128计 ，又由于形成肽键，而每个氨基酸残基的平均分子量可按110估算。 /tools/mwcal/MyMW.asp 第三节 质谱法研究蛋白质 质谱法： 将被分析的分子（分析物）先在一个真空室中离子化，当新带上电的分子