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第三章 遗传的分子基础 目 录一、染色质与核酸结构 0.5学时二、DNA复制0.5学时三、RNA转录与加工0.6学时四、遗传密码与翻译0.3学时五、基因概念与发展(自学) 0.1学时 1974年Kornberg等,小球菌核酸,酶消化、剪切、离心、凝胶电泳、电镜观察。染色质是由100埃的核小体组成丝状结构,呈DNA单链。一、染色质与核酸结构(一)染色质(chromatin)染色质水解实验化学组成DNA:27% RNA :6%蛋白质:67%基本结构单位核小体连接丝一、染色质与核酸结构(二)染色体(chromosome) 细胞分裂过程中染色质聚缩成棒状结构。腺苷酸(dAMP)鸟苷酸(dGMP)胞苷酸(dCMP)胸苷酸(dTMP)尿苷酸(dUMP)核苷酸种类:5种DNA特有核苷酸RNA特有核苷酸一、染色质与核酸结构(三)DNA结构1.结构单位——核苷酸(nucleotides) 包括:磷酸、糖基及碱基⑴3`→5 `方向连接与DNA极性→螺旋⑵氢键相连与变性和复性→复制转录⑶碱基排列与生物多样性; 某基因有1kb能多少种遗传信息?一、染色质与核酸结构(三)DNA结构2.一级结构——多聚核苷酸(polynucleotides) DNA双螺旋结构,即DNA二级结构⑴双链反向平行,产生向心力,维持DNA双螺旋结构⑵氢键相链产生结合力,维持DNA双螺旋结构。⑶碱基堆积产生堆积力,维持DNA双螺旋结构。 DNA高级结构是超螺旋结构和折叠状染色体结构一、染色质与核酸结构(三)DNA结构3.双螺旋结构(double helix) tRNA有3300余种,2个共同点⑴75-94bp, ⑵发夹状二级结构,有3环1臂①反密码子环:识别三联密码②双氢尿苷环:识别氨基酸③假尿嘧啶环:识别核糖体④氨基酸臂: 连接氨基酸。一、染色质与核酸结构(四)RNA结构1.tRNA结构 rRNA,120-2900bp,发夹状主要功能区①tRNA识别结合区:如5SrRNA就有5`CGAAC序列能识别核糖体②不同rRNA亚基识别区:能与分子量不同的核糖体结合。③与基因表达调控密切相关CAU就是mRNA起始密码AUG密码。能识别AUGtRNA结合区与不同亚基识别一、染色质与核酸结构(四)RNA结构2.rRNA结构① Meselsen 15N标记E.coli 3代DNA复制:亲代为底峰,一代为中峰,二代中、上峰各半证明了半保留复制。② Taylor蚕豆根尖减数分裂姊妹染色单体差别染色二、DNA复制1、半保留复制(semiconservative replication) DNA5`→3`链连续合成,另一条链先合成冈奇用片段,在DNA聚合酶、引物酶、连接酶、拓扑异构酶解旋酶等30多种蛋白质作用下完成DNA复制。二、DNA复制2、半不连续复制(semidiscontinous replication)① θ型双方向复制 Cairns(1963), E.coli DNA , 3H-dTMP标记,子一代呈小点园圈,二代呈Y形复制叉(replication fork) ;称θ型复制模型。② σ型单方向复制 E.coli有致育因子为雄性,无者为雌性。致育因子是从单连切口单方向、边滚动边复制,既滚环复制,又称σ型复制。二、DNA复制3、复制方向 E.coliDNA出现多个复制叉,说明有多个复制起点,并都有短RNA片段引物引导。二、DNA复制4、复制起点与引物 线粒体DNA(mtDNA)是不对称、不同步的D环复制。 mtDNA重链H先复制,并置换亲链产生D环,当D环置换到轻链L起点时(约2/3长度)H反向复制新链,H.L同步复制结束后子代释放,1/2子代基因组因H链继续完成新链复制。这种不对称不同步DNA复制称D环复制。二、DNA复制5、D型不对称不同步复制 染色体端粒有多个Gn(A/T)m重复序列防止核酸酶降解,端粒酶(telomerase)完成端粒。 动物多以TTAGGG重复,端粒酶RNA核心序列为AAUCCCAAU,是端粒复制模板,能与TTA配对;每复制 1个TTAGGG后,移位复制出下一个。多次循环后重复序列够以折回形成 t 环,完成端粒DNA复制。二、DNA复制6、T型折回成环复制三、RNA转录与加工 RNA聚合酶以A、U、G、C为原料,与DNA模板链形成RNA/DNA杂合链,3`→5`为方向合成RNA。 有5个作用:识别启动子、解链、合成RNA、定转录方向和识别终点。 (一)RNA转录(transcription)1、RNA聚合酶三、RNA转录与加工⑴步骤 识别→转录→终止→释放强、弱终子释放RNA有3大差别:①有无回文环结构之别②富含GC与富C贫G之别③不依赖与依赖 ?之别⑵特点①空间性,有意链特定区②时间性,特定时间③同步性,边开边录边闭(一)RNA转录(tra
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