第五章__化学毒物的一般毒性作用.ppt

* 如研究肝脏代谢酶时尽量避免选用具有肝酶诱导作用的麻醉剂(巴比妥类等)。 * 动物的组织形态与种属有关，需了解不同种属动物的组织结构特点，才能准确地作出评价，如小鼠肝脏分四叶，有胆囊，而大鼠月于脏为六叶，无胆囊。 * 例如乙醇急性中毒引起大鼠肝小叶周边区细胞脂肪变性，每个剂量组出现脂变的动物数随染毒剂量递增而增加。 如果随剂量增加，不同剂量染毒组动物的病变程度加重，则可能由实验因素引起者居多。当一个脏器中同时出现几种病变时，可依据各种病变的损害范围所占比例的差别，来分析病变与毒作用的关系。 化学毒物具有高度易感性。化学毒物通过直接或间接作用对神经系统产生损害，其损伤分为原发性病变和非特异性继发性损伤。原发性损伤指化学毒物直接作用于神经系统的特定部位，形成原发病灶引发形态、功能的改变，基本病理改变包括：①神经元病变(neuronopthy)；②轴突病变(axonopathy)；③髓鞘病变(myelinopathy)。 继发性病变指继发于血管损害、低氧、代谢障碍或变态反应等因索引起的神经损伤，以及由于心肺功能障碍和肝肾功能衰竭引起的神经损伤。这类病变较多见，但均为非特异。基本病变包括：①中毒性脑水肿；②脑缺氧性病变；③重要器官衰竭并发脑病；④营养缺乏性神经病变：如Wernicke-Korsakoff脑病和脚气病等。 二、病理学检查方法在毒理学中的应用 病理学检查实际上从试验之初就开始了，它参与对实验动物的选择、试验过程对照组和染毒组动物的观察、试验中期和结束时动物的处死解剖和组织病理学观察、死亡动物的原因分析等，在整个试验过程中扮演着重要的角色。 (一)实验动物的处死 毒理学研究工作除了对死亡动物或濒死动物进行必要的病理解剖观察外，根据不同的试验要求常常要对存活的动物定期处死，或在不同时期分批处死，以动态观察其病理变化。 处死动物的方应根据动物的种属和实验的要求选择。原则上一方面应注意所选择的处死方法对形态和机能观察指标不会产生明显影响。根据实验要求选择合适的方法，尽量减少因麻醉或处死方式不当对研究指标造成干扰。另一方面应尽量减少动物脏器因处死方法所造成的病理损害，尽量减少人为假象，以免影响实验结果。 实验动物的处死，应采用所谓安乐死法。 ⑴颈椎脱臼法 本法常用于大鼠、小鼠。先将动物放在笼盖或粗糙台面上，左手用镊子或用左手拇指、食指用力往下按住头后部，右手抓住鼠尾，用力稍向后上方一拉，使其颈椎脱臼，造成脊髓与脑髓脱离，动物立即死亡。 ⑵空气栓塞法 主要用于大动物的处死，用注射器向动物静脉内急速注入一定量的空气，随心脏的跳动，空气与血液相混呈泡沫状，随着血液循环到全身，阻塞血管。 ⑶急性大失血法 用粗针头一次采取大量心脏血液，可使动物致死。 ⑷过量麻醉药麻醉法 ⑸二氧化碳吸入法 ⑹击打法 ⑺化学药物致死法 ⑻断头法 断头虽然残酷，但只是一瞬间，且脏器含血量少，便于取样检查，此法适用鼠类等小动物。可用直剪刀，亦可用断头器。 (二)实验动物的剖检和取材 1.解剖 动物解剖要求迅速、细致，注意对大体解剖的正确操作，逐个系统和器官仔细观察，检查脏器组织的形状、体积大小、色泽、位置、硬度、外覆被膜、分泌物、出血、肿物和切面等变化，并作完整、详细的记录。 解剖顺序一般是先腹腔后胸腔，然后脑和神经、脊髓等。但可视实验目的而变动。 化学毒物引起器官组织损伤和病理学改变，往往也能在脏器重量上反映出来。脏器系数是内脏器官重量(g)与体重(g、100g、kg)的比值，可大致反映组织肿大或萎缩的情况，因此脏器称重测定脏器系数是病理形态学检验重要而敏感的常规指标之一，适用于实质器官。 2.组织取材和固定 实际工作中，应根据实验目的和可能受累的脏器，有的放矢地进行取材、送检。一般来说， 小鼠主要脏器可全部保留，大动物则留取一部分脏器标本。 取材时应注意：①动物处死后立即解剖检查，及时取材，以免组织自溶、干燥、皱缩和变形；②取材顺序按解剖步骤，或依实验目的而有所侧重，检查脏器后立即取材；③各动物取材部位应统一，以便各组之间具有可比性。若肉眼可见病变，取材则应包括病变部位以及病变与正常组织交界处的组织； ④取材组织块的切面应包括重要结构或全层，空腔脏器如胃肠应将内容物冲洗干净；⑤切取组织块大小可根据实验目的而定，光镜检查以不超过1cm3为宜；⑥取材时刀、剪要锋利，勿挤压组织块变形，应选取未被器械钳夹、压迫的部位进行固定。 常用的固定液有10％中性甲醛(福尔马林，formalin)、Bou