《职业卫生与职业医学》20第四章第三节生物监测.ppt

超临界流体萃取根据操作的方式不同分为动态、静态和循环萃取三种。 九、微波萃取法 原理：是液固萃取的改进，利用极性分子可迅速吸收微波能量，来加热一些具有极性的溶剂，如乙醇、甲醇、丙酮或水等等，以增加萃取温度，从而减少溶剂的用量和提高萃取效率。 方法：是将样品置于聚四氟乙烯材料的样品杯中，加入萃取溶剂后，将样品封闭好，置于微波炉中进行加热萃取。 优点：回收率高，精密度好。 注意事项：利用微波萃取可以达到常压下使用同样溶剂所达不到的萃取温度，但由于温度过高，有可能将待测物分解，所以，应根据待测物的热稳定性选择适宜的萃取温度，达到在保证待测物稳定的同时，提高萃取效率。 一 无机成分测定的预处理 一、 稀释法 二、溶剂萃取法 三、溶解法 四、 干法灰化法 五、湿法消化法 六、固相萃取法 在职业卫生检测中，无机成分如铅、镉、锰、汞、砷等是经常检测的有害物质，所检测的生物样品主要有尿、血、头发和组织等。 ??一、 稀释法 是一种最简便而有效的方法，一般直接将尿液或血液等用稀释剂稀释后，供测定。 稀释的作用一方面可以将待测物的浓度降至测定方法的测定范围内，另一方面可减少样品中基体的浓度，以降低测定的背景值和干扰。 选用何种稀释剂和稀释到什么程度，要视样品的性质和所用测定方法而定。 一般可将血样或尿样用去离子水或稀硝酸溶液或含Triton的稀硝酸溶液作稀释剂，含氧酸有助于消除无火焰原子吸收测定中的干扰。 用含有基体改进剂的稀释剂稀释样品，对消除基体干扰，比单用去离子水稀释的效果显著。常用的基体改进剂有硝酸铵、硝酸镍、氯化钯、磷酸氢铵和EDTA。 二、溶剂萃取法 样品通过溶剂萃取，达到从样品中分离和浓缩待测物的目的。 最简单的方法是用稀酸或去离子水将待测元素或金属离子从样品中分离。 例如测定血铅时，用6mo1／L硝酸溶液使蛋白沉淀，离心后取上清液进样测定，所得结果与湿消化处理一样。 用1mo1／L盐酸或硝酸溶液浸泡组织，可萃取出组织中的镉、铜、锰和锌等。 另一种经常使用的溶剂萃取方法是用络合剂先与金属离子络合，生产络合物，再用有机溶剂萃取络合物。例如双硫腙法测定尿中铅、镉等。 三、溶解法 一些固态样品经适当溶剂溶解后可直接进行测定，例如：毛发、指甲、骨等组织样品用氢氧化四甲基铵(TMAH)乙醇溶液处理24h，生成一种均匀的混合液，然后注入石墨炉，进行原子吸收光谱法测定某些金属元素。 四、 干法灰化法 对部分不易挥发的重金属元素的分析。 可先将样品放在坩埚内烘干，然后将坩埚转移至高温炉内700～800℃灰化12h左右，使有机成分完全破坏，样品成灰白色粉末，再用稀酸溶液溶解后供测定。 有时可加些助灰剂如硝酸镁，以减少待测物的损失和帮助灰化。 警惕耐火材料对样品的污染和待测物的损失。 五、湿法消化 （一）酸式消化法 （二）碱式消化法 （二）碱式消化法 （一）酸式消化法： 根据样品和待测物的性质，选择以硝酸、硫酸、高氯酸或过氧化氢等的不同混合配比溶液作为消化液，利用氧化性破坏样品中的有机成分，加热可以促进消化，温度越高消化越快，一般在200℃左右，挥发性待测物应在200℃以下消化。 高氯酸是强氧化剂，在加热过程中容易发生爆炸，使用时要注意安全。 （二）碱式消化法： 用氢氧化钠溶液与样品一起加热，有机样品在强碱状态下受到破坏，再调整pH值，作后续分析。 碱式消化法只能用于过渡金属、重金属和镧系元素的分析，不能用于碱金属的分析。 （三）微波消化法： 是利用微波加热的作用，在密闭的消化管内，将样品进行酸式消化的方法。 消化过程是在密闭容器内进行，又有微波的作用，因此，具有消化液用量少，消化时间短，挥发性待测物不易损失，外来污染少等优点。 六、固相萃取法 利用固体吸附剂对样品中的待测物通过吸附、分配或离子交换等作用，将待测物截留在柱子上，然后用少量洗脱液洗下,从而达到消除样品基体和干扰影响及富集待测物的目的。 用于金属离子分离浓缩的固相萃取剂通常是离子交换剂或螯合剂。当样品溶液通过离子交换剂或螯合剂柱时，样品中的金属离子被交换或螯合在固相萃取剂上，然后再用适当的酸溶液洗脱下来。 例如，将尿样通过巯基棉小柱，尿液中的镉离子富集在巯基棉上，然后用0.2mol/L盐酸溶液解吸。 二、有机成分测定的预处理 生物样品中微量有机成分的测定是比较困难的，因为有机成分种类多，还包括它的代谢物，而且大多数含量低，因此，要从复杂的样品基体中将微量的有机待测物分离或浓缩出来，需要较好的样品预处理方法。 常用方法： 一、顶空法 二、扩散法 三、水蒸气蒸馏法 四、溶剂萃取法 五、固相微萃取法 六、膜分离技术 七、柱前衍生化技术 八、超临界流体萃取法 九、微波萃取法 一、顶空法 顶空法又称为气体萃取法