_BSA检测（ELISA）试剂盒的研制.doc

分 类 号 学 号 学校代码 密 级 硕士学位论文 BSA 检测（ELISA）试剂盒的研制 学位申请人 ： 学 科 专 业 ： 药剂学 指 导 教 师 ： 答 辩 日 期 ： 原 创 性 声 明 本人郑重声明： 所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，遵照严肃求实的科学精神，独立进行研究工作所取得的成果。论文中除已注明引用和致谢的内容外，不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对论文研究做出贡献的个人或集体，均在论文中作了明确声明并表示了谢意。本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名： 日 期 ： 学位论文版权使用授权书 本人完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的印刷件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权湖北科技学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等其他复制手段保存和汇编本学位论文。 保密?，在_____年解密后适用本授权书。 本论文属于 不保密□。（请在以上方框内打“√”） 学位论文作者签名： 年 月 日 导师签名： 年 月 日 湖北科技学院硕（博）士学位论文 目录 1 2 3 4 1 BSA 国家标准品的标定 5 1.1 试剂及仪器 5 1.2 实验方法 6 1.3 实验结果 7 1.4 实验小结 7 2 BSA 多克隆抗体的制备 8 2.1 实验材料及试剂 8 2.2 实验结果 8 3 BSA 双抗夹心 ELISA 检测方法的建立 8 3.1 实验材料及设备 8 3.2 实验方法 10 3.3 小结 14 4 BSA 检测试剂盒的方法学验证 15 4.1 实验材料 15 4.2 实验方法 15 4.3 实验结论 21 5 BSA 检测试剂盒保存条件的探索 22 5.1 实验主要材料 22 5.2 实验主要设备 23 5.3 实验方法 23 5.4 实验结论 34 34 7 参考文献 35 8 生物制品中杂质 BSA 检测方法分析的文献综述 36 9 参考文献 41 42 湖北科技学院硕（博）士学位论文 缩略词 BSA Bovine Serum Albumin 牛血白蛋白 DMEM Dulbecco's modified eagle medium 达尔伯克式改良培养基 ELISA Enzyme-linked immuno sorbent assay 酶联免疫吸附测定法 G Gram 克 H Hour 小时 HRP Horse radish peroxidase 辣根过氧化酶 HCP Host cell protein 宿主细胞蛋白 HSA Human Serum Albumin 人血白蛋白 NMPA National Medical Products Administration 国家药品监督管理局 OD Optical Density 光密度 PBS Sodium phosphate buffer 磷酸盐缓冲液 PCV Porcine circovirus 猪圆环病毒 SPR Surface plasmon resonance 表面等离子共振 TQM Total Quality Management 全面质量管理 TMB 3，3'，5，5'-Tetramethylbenzidine 3， 3'，5，5'-四甲基联苯胺 1 湖北科技学院硕（博）士学位论文 中文摘要 目的：研制牛血清白蛋白（BSA）残余量的检测试剂盒，降低检测成本。 方法：采用 ELISA 法检测 BSA 残余量，确定该检测方法的实验条件，并对该方 法进行方法学验证。同时对试剂盒的稳定性进行初步研究。 结果：确定了 ELISA 检测方法的实验条件，并进行了专属性、重复性、线性、 检测范围等研究。初步稳定性研究显示，添加了稳定剂 Procline300 的 BSA 标准 品可保存 1 个月。 结论：建立了 ELISA 检测 BSA 残余量的方法，该方法具有重复性好，稳定性高， 专属性强等特点。 关键词：酶联免疫实验，牛血清白蛋白，方法学验证，专属性，重复性 2 湖北科技学院硕（博）士学位论文 Abstract Objective: To develop a kit for the detection of BSA residues and reduce the cost of detec