《药用植物育种学总论版-》-精选课件(公开).pptVIP

第二节 单倍体育种 一、单倍体在植物育种上的重要性 单倍体植物是具有配子体染色体数目的孢子体，不能正常进行减数分裂，所以不育，植株矮小，生长势弱。但加倍后既是纯合的二倍体，在育种上有特殊意义。 （一）控制杂种分离，缩短育种年限。 F1（F2）花药 单倍体植株 纯合二倍体 从杂交到获得纯系只需2年，大大缩短了育种年限。 （二）大大提高育种的选择效率 AAbb?aaBB F1(AaBb) 4种配子 16种基因型 4种基因型 期望基因型比例高，且与表现型一一对应，所以选择效率高。 ? 花药培养 离体培养，诱导 染色体加倍 （三）与诱变育种相结合，可以挽救隐性突变 诱发产生的隐性突变在当代不表现，经自交后才可能被分离出来。在M1代隐性突变很可能被丢失。将M1代花药进行组织培养可避免这种风险。 （四）有利于远缘杂种新类型的培育和稳定 在远缘杂交中，经常出现杂种不育现象，如果任其自交或天然杂交，很难得到正常可育的后代，通常表现为染色体配对不正常、败育以及染色体丢失。 如果进行花药培养，诱导产生单倍体，再加倍成二倍体，便可迅速得到稳定遗传的纯合二倍体。 二、花药及花粉培养 （一）花药培养 首先进行花粉发育期镜检，选择合适的发育期，找出与之对应的花蕾外部特征，根据花蕾外部特征选材。 选取的花蕾用饱和漂白粉溶液消毒10-20min，或0.1%的升汞消毒7-10min，再用无菌水冲洗2-3次。剥离出花药均匀地平放于培养基上或悬浮于液体培养基中。 离体花药在20-28OC，1000-2000Lx光照或黑暗条件下培养。20-30天后，从花药裂口处即可长出 愈伤组织 若干小植株 胚状体 一群小植株 及时分开小植株并移植到新的培养基。 转移到分化培养基 发 育 （二）花粉培养 从花药中分离出花粉接种在培养基上诱导形成植株。 目前在单倍体育种中，直接利用花粉成功诱导植株的植物还不多，有认为是缺少花药壁的诱导启动作用。 花粉培养的方法有哺育培养法和单细胞培养法。 哺育培养法：夏普（Sharp)1972年在番茄花粉培养中创造。做法是，先将番茄花药划破，放在琼脂培养基上，上面盖一张消过毒的滤纸片，使与花药接触，然后滴一滴番茄花粉悬浮液于滤纸上，在光照条件下培养1月左右即可出现薄壁细胞无性系。 由于花粉与花药接触，可以促进小孢子的启动。 三、未授粉子房、胚珠培养 未授粉子房和胚珠培养离体诱导雌核发育的研究已近半个世纪，目前共有20个科40余物种种子植物的未授粉子房或胚珠离体培养诱导了雌核发育，其中成功获得雌性单倍体的植物有10个科25个物种2个变种。 我国已成功地在玉米、小麦、烟草、水稻等作物培育出单倍体，用酶解法游离金鱼草新鲜胚囊获得成功，从胚囊直接诱导出单倍体。该技术的优点在于得到的植株通常是绿苗和单倍体。 四、利用单性生殖获得单倍体 在孢子体减数分裂后形成了配子且正处于开花期的植株上，进行人工诱导促使配子单性生殖，可获得单倍体。诱导方法有： （一）生物方法 1.远源花粉刺激 用异种、异属花粉授粉诱发孤雌生殖。 2.延迟授粉 去雄后延迟授粉诱发产生单倍体 3.半配合 授粉后雌、雄两核不融合，独自分裂形成单倍体。 4.从双生苗中选择 植物中，尤其是裸子植物中常出现双胚或多胚现象，有望选到单倍体。 5.染色体消失 远源杂种胚的发育过程中，一个亲本的染色体消失，仅存另一亲本的染色体，最终形成单倍体。 （二）物理方法 在开花前至受精的过程中，用射线照射花以影响受精过程；或照射父本花粉再给去雄的母本花授粉，刺激卵细胞分裂，诱导产生单倍体。 （三）化学方法 一些化学药物能刺激未受精的卵细胞发育成单倍体植株。常用的化学药剂有硫酸二乙酯、2，4-D、NAA、6BA、三甲基亚胺等。 三、多倍体在药用植物育种中的意义 （一）增加现有物种的染色体数目，产生同源多倍体 多倍体由于染色体加倍后的剂量效应，植株的细胞和器官表现出“巨型性”，某些有效化学成分含量高，抗性增强等特点。 1.满足大多药用植物对药材生产的要求。 2.通过诱导产生新的多倍体，进而选育新品种。 （二）通过远源亲本或种间不育杂交种的染