哮喘患者PBMC中转录因子AP1变化研究.pptVIP

Shandong University Affiliated Qilu Hospital 哮喘患者PBMC中转录因子AP-1的变化研究 山东大学齐鲁医院呼吸内科 董 亮 哮喘患者PBMC中转录因子AP-1的变化研究 * 前言 资料与方法 结果 讨论 * 山东省科委科研基金资助项目（1999BBICJB4） 前言 支气管哮喘是一种气道变应性炎症; 以嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细 胞浸润为特征; 同时有多种细胞因子、炎性介质参与[1]; 其中细胞因子和炎性介质的调节和释放 是一个DNA转录的调节过程。 参与转录调节的一些特殊蛋白质，称之为转录因子或调节因子。 [Br Med Bull 1995;51 368～84] 转录因子活化蛋白-1 AP-1(Activator Protein-1) 是支气管哮喘炎症过程中一个重要的炎症调节因子[2] [N Engl J Med 1995;332:45～7] 资料与方法 病例采集 实验方法 资料统计 资料与方法—病例采集（1） 发作期支气管哮喘病人12例（激素敏感型哮喘-SS组），病人来自山东医科大学附属医院门诊1999.1-2000,3的就诊病人，，所有病人均符合第二届全国哮喘会议制订的诊断标准[3]，病人在3个月内未服用或吸入应用糖皮质激素； [中华结核与呼吸杂志，1997，9] 资料与方法—病例采集（2） 激素抵抗型哮喘病人4例（SR组），病人来自1998.1-2000.3的随访病人。除符合第二届全国哮喘会议制订的诊断标准，还参照Carmichael诊断标准[4]； 慢性阻塞性肺疾病组10例（COPD组），病人来自山东医科大学附属医院门诊或住院病人，均符合1999.9大连会议制订的COPD诊断标准[5]； 正常成人对照组10例（Normal组），无慢性炎性肠病、关节炎及其它心、肺、肝、肾等疾病的健康成年人。 ??????? ?[? Br. Med J 1981, 282: 1419-1422] 表1：各组病人及正常人对照一般、临床资料表 分组 样本数 性别 年龄 FEV1.0 (n) (男:女) (岁) (%Pred) Normal 10 6;4 21.5±1.1 101±3.4 COPD 10 4:1 58.4±3.8 53.0±9.4 SS 12 8:6 29.0±5.6 65±4.8 SR 4 2:2 32.0±4.7 60±8.4 资料与方法—实验方法 标本的采集与处理 PBMC的分离 核蛋白抽提 双股DNA探针的制备 DNA探针的放射性同位素标记 DNA-核蛋白反应及凝胶迁移率实验 放射性同位素液闪计数测定放射比活性 资料与方法—资料统计 所有资料的表达均采用X±SD表示，实验组与对照组数据进行方差分析，实验组两组数据进行相关分析。P0.05表示有显著差异,统计软件采用SPSS。 结果 结果 表3：AP-1/OCT-1在哮喘组及慢阻肺组、正常人对照比较 分组 样本数（n） X±SD p值 ? 正常人组 10 .7220 ± 6.861E-02 慢阻肺组 10 .7340 ± 5.727E-02 SS组 12 .8117 ± 6.590E-02 p0.01* SR组 4 .8925 ± 7.932E-02 p0.01**▲ *SS组与正常人及COPD组间有非常显著差异 (p0.01) ** SR组与正常及慢阻肺组间有非常显著差异 (p0.01) ▲SR组与SS组有非常显著差异（p0.01) 讨论（1） AP-1是一种由原癌基因产物c-fos和c-jun构成的异源二聚体,通过其亮氨酸拉链结构与DNA特异位点TRE（肿瘤激动子 12-o-tetradecanoylphorbol-13-acctate TPA反应元件）结合,从而成为许多炎性基因表达的重要调节因子[6]。 [Curr. Opin Cell Biol 1996;271:15703～7] 讨论（2） AP-1的活化对炎细胞增殖与分化意义