培养基准备和灭菌设备.ppt

第六节 固体培养基制备 发酵的类型按培养基的种类来分：有机发酵和液体（深层）发酵 固态发酵：微生物在具有一定温度和湿度的固体表面进行生长和繁殖。 固体培养基的碳源主要来自小麦、麸皮、玉米、碎米、大麦、高梁、米糠等淀粉质原料，氮源主要来自大豆、豆粕、豆饼、花生饼、蚕豆、豌豆等蛋白质原料。 一、固体培养基制备的工艺流程 固体培养基的制备的主要设备有粉碎设备、润水设备、混合设备、蒸煮灭菌设备、冷却设备等 二、主要设备 1．润水设备 润水的目的一方面是使原料中蛋白质含有适量水分，以便在蒸料时迅速使蛋白质适度变性（即蒸熟），另一方面是使原料中淀粉吸水膨胀易充分糊化，以便溶出菌种生长所需要的营养物质。而且润水还能够供给菌种生长繁殖所需要的水分。 1.1 最简单的润水设备是在蒸锅附近用水泥砌一个平地，四周砌一砖高围墙，以防拌水时水分流失，水泥平地稍向一方倾斜，以便冲洗排水。润水方法象拌水泥一样。在固体粉碎原料中加入50～80℃热水。用钉耙与煤铲靠人工翻拌，使主、辅料混合均匀。 1.2 利用螺旋输送机将粉碎后的主辅料不断送入绞龙，一面加入50～80℃的热水，一面通过螺旋输送进入蒸锅达到润水的目的。绞龙的底部外壳，要求制成一边可以脱卸型，便于润水完毕清洗干净，以免细菌污染而发臭。 3）目前国内多数工厂采用N.K式旋转蒸煮锅，如图2-51所示。原料经真空管道吸入蒸锅，或用提升机将原料送入蒸锅，直接喷入50～80℃的热水，开启旋转锅，翻拌润水。 2．蒸煮设备 固体培养基也和液体培养基一样，要进行蒸煮灭菌。蒸煮的目的主要有以下三个方面： （1）对固体培养基进行灭菌，而且还可杀死固体原料上存在的一些虫卵。 （2）使培养基中的蛋白质完成适度变性，消除培养基中生大豆等物质所含的酶阻遏物质，成为酶容易作用的状态，未经变性的蛋白质，一般很难为酶所分解。 （3）蒸煮使淀粉原料先是吸水膨胀，随着温度的上升，淀粉粒的体积逐渐增大，分子链之间的联系消弱，达到颗粒解体的程度，这样淀粉就发生糊化后变成淀粉糊和糖分，这些成分能够更利于菌体的生长。 由于固体培养基大多呈粒状、片状或粉状，流动性弱，不易翻动，吸水加热容易成团，冷却困难，故针对固体培养基的特点，设计了多种蒸煮灭菌设备，主要有以下几种形式： 2.1 常压蒸煮锅 常压蒸煮较难蒸熟，为此要采取分层进料法。即蒸料前必须先把锅内水煮沸或开启蒸汽，把润水后的原料一层层均匀的洒入锅内，注意洒入原料必须顶着蒸汽，即在冒蒸汽处铺上一层原料，洒料时注意松散，切忌进料太快，压实，避免蒸汽不畅通的地方出现生料。进料完毕，为避免锅底冷凝水聚结，先排放锅底蒸汽冷凝水后，加盖蒸煮1～2小时，停火或关汽，焖2～4小时，出锅。 2.2 加压蒸煮锅 加压蒸煮锅为能承受一定压力的圆筒型钢板蒸煮锅，锅底部设 有假底（竹编或有网眼的金属板），假底下通入蒸汽，并设有排水阀。靠近假底处开有刀门，便于出料。刀门及加盖处配有元宝螺丝。锅盖设有排气阀及压力表。 操作时，先开蒸汽，排除冷凝水，待冒汽后，缓慢将润水后的原料洒入，洒料要均匀疏松，造成蒸汽不透。进料完毕，待面层冒汽后，然后加盖捻紧元宝螺丝，升温，当压力升至4.9×104Pa时，关蒸汽，开启锅盖上的排气阀，排除干净锅内余汽，继续开蒸汽，关闭排气，当压力上升到11.77×104Pa左右，保持15分钟，关闭蒸汽再焖锅15分钟。 2.3 集搅拌、蒸煮、冷却于一体的蒸煮灭菌设备 a．N.K式旋转蒸发锅是一个既能受压加热又能减压冷却的容器。在润水蒸料时，可以360°旋转运动。旋转锅由锅身，支柱，旋转装置，配水力喷射泵真空冷却，及真空泵吸料投料口和出料口等部分组成。20年来，国内旋转锅不断改进，目前罐体以立式双头锥为主，也有球形，容量一般为5～6m3。 转鼓式蒸煮灭菌机有一转鼓，用钢板焊制，能承一定压力。鼓中心有空心横轴，转鼓固定在轴上，轴则装在支架两端的轴承中，借齿轮传动。鼓上下两端有原料进出口，装料后，旋紧进出口盖它就如同密封容器。转鼓徐徐转动，转速为0.5～1r/min，培养基在鼓内得到翻动，同时蒸汽沿轴中心通入鼓内，加热固体培养基，加热到一定温度后，进行保温灭菌。灭菌完毕，用真空泵沿空心横轴抽真空，鼓内压力降低，热培养基得到迅速冷却。冷却时转鼓仍照常旋转，冷却后，将固体培养基卸出。 第三节 纤维素和半纤维素的水解 可以利用的生物质资源很多，包括各种农业残余物 、林业残余物、专门栽培的作物以及各种废弃物。这些木质纤维材料完全可望将它们降解转化为糖类，并生物加工成有用的物质，如生物能源等。 一、蒸汽爆裂法 二、稀酸预处理法 三、酸酶水解法 一、蒸汽爆裂法 向装有植物纤维物质的压力罐通入高压蒸汽，使罐温度达到200-240℃左右，原料中的半纤维素