分光光度法测定保健食品中D_氨基葡萄糖盐酸盐.docVIP

理化检验-化学分册P TCA(PAR T B:C H EM1ANAL.2008年　第44卷　②知识与经验 分光光度法测定保健食品中 D2氨基葡萄糖盐酸盐 朱骤海1,何俊婷1 (陕西新药技术开发中心,西安710065郭　楠2,李稳宏2,刘明霞2,高　蓉2 (西北大学化工学院,西安710069 中图分类号:O657.32　　　文献标识码:B　　　文章编号:100124020(2008022******* 　　D2氨基葡萄糖盐酸盐(GCSM是甲壳素经盐酸水解得到的白色晶体,它是合成抗癌药物氯脲霉素的主要原料,是骨关节止痛药及抗生素的增效剂,也是食品甜味剂、抗氧剂,又是双歧杆菌培养基的主要成分之一[124]。因此,多年以来人们一直在研究和开发含GCSM类的保健食品甚至相关药物,为保证开发保健食品的质量,其中有效成分GCSM含量的准确测定具有十分重要的意义。目前,对含90%的GCSM保健食品分析测定已有报道[5],而对含40%左右GCSM保健食品分析却未见报道。本研究以含40%的GCSM保健食品为对象,采用紫外2可见分光光度法对其有效成分进行分析。 1　试验原理[5] D2氨基葡萄糖在碱性条件下与2,42戊二酮缩合可形成生色原22甲基232二乙酰吡咯衍生物,生色原与对2二甲氨基苯甲醛(PDABA在酸性条件下结合呈现红色,利用上述显色原理通过紫外2可见分光光度计分别测定样品中有效成分的含量。 2　试验部分 2.1　主要仪器与试剂 2501vp型紫外2可见分光光度计;BM F26B (SM型超微粉碎机;SND2000型超声提取仪。 磷酸三钠2四硼酸钠溶液:将0.33mol?L-1磷酸三钠溶液和0.25mol?L-1四硼酸钠溶液以98比2混合。 2,42戊二酮溶液:取磷酸三钠2四硼酸钠溶液19.3mL,加入2,42戊二酮0.7mL,摇匀,临用前 收稿日期:2006210217配制。 PDABA溶液:称取PDABA溶液1.6g,加入浓盐酸15mL,搅拌溶解后,再加入异丙醇105mL 混合备用。 GCSM标准溶液:称取GCSM标准品(纯度≥99%0.012g于100mL热水中,配制成120mg ?L-1标准溶液。 2.2　试验方法[5] 移取适量样品溶液于25mL具塞比色管中,用水补至2mL;再加2,42戊二酮溶液1.5mL,摇匀, 100℃水浴加热30min;冷却至室温后,加PDABA 溶液5mL,具塞摇匀,放置5min。以空白样为参比,在525.5nm波长处测定吸光度,求出GCSM的含量。 3　结果与讨论 3.1　最大吸收波长选择 分别移取GCSM溶液1mL于25ml具塞比色管中,用水补至2mL;再加入2,42戊二酮溶液1.5mL,按试验方法进行测定。试验结果表明: GCSM标准溶液在525.5nm波长处有最大吸收。 3.2　标准曲线的绘制 分别吸取120mg?L-1GCSM标准溶液0.25, 0.50,0.75,1.00,1.50mL(相当于30,60,90,120, 180μg GCSM,用水补至2.0mL,空白样为2.0mL蒸馏水,按试验方法测定吸光度,并对其进行回归计算,回归方程为y=0.0039x-0.0163,相关系数为0.9993。 3.3　样品测定结果 称取粉末样品0.0304g,用水溶解后定容于250mL容量瓶中,取样品溶液2mL于25mL具塞比色管中,按试验方法对样品进行分析,测定结果分 ? 3 8 1 ? 理化检验-化学分册 朱骤海等:分光光度法测定保健食品中D 2氨基葡萄糖盐酸盐 别为27.61%,32.39%,38.74%。试验结果表明:样品中GCSM 含量极不稳定,分析其主要原因是含40%GCSM 的样品,其余成分为淀粉、糊精等添加辅料,其混合度、均质化程度的水平直接影响了分析的精度,故对此类样品必需进行预处理。 经试验,样品的预处理步骤[628]为:先将样品粉碎至一定的粒径,然后与定量的水混合,用超声波提取仪处理一定的时间,反复多次过滤,即可得到均匀度和透明度均好的待测样品。 分别吸取处理过的样品溶液2mL 于25mL 具塞比色管中,按试验方法进行测定,结果为32.71%,36.25%,31.46%,33.33%,32.39%,34.68%,平均值为33.47%,标准偏差为1.73%,相对标准偏差为5.2%。经过计算该试验的置信区间为0.0112~0.03469,而标准偏差为0.00173,在置信区间范围内。 按试验方法处理样品,并加入GCSM 标准进行回收试验,结果见表1。 表1　回收率试验结果(n =6 T ab.1　R esults of recovery test 本底值 Content of GCSA in sample m /mg 标准加入量Am ′t of std. GCSA added m