泌尿系统感染微生物学检验工作.pptVIP

上海交通大学医学院 定量 膀胱穿刺取尿作定性，只要培养出细菌，不论细菌数多少，均认为是感染，不会出现假阳性。是避免尿培养污染的最好方法。缺点是患者有一定痛苦。 尿液细菌培养：尿道口周围亦有大量细菌。表皮葡萄球菌、链球菌、枯草杆菌、变形杆菌、大肠埃希菌、乳酸杆菌、卡他布兰汉菌及耻垢分枝杆菌等。细菌常混入尿中，但细菌数小于103/毫升。 上海交通大学医学院 定量清洁中段尿涂布法 目的是运用中段尿培养菌落计数的方法鉴别是否为尿路感染。 常用定量接种环法，取1μl\ 10μl的新鲜中段尿，均匀涂划在血液琼脂平板上，37℃，24小时孵育，整个平板上所见的菌落数乘以1000即得每毫升菌落数。 计数生长的菌落数，生长过多不可计数时，报告105cfu/ml即可。根据菌落形状及涂片镜检特征，选择相应方法进一步鉴定。48h无细菌生长方可报告“无细菌生长”。 上海交通大学医学院 倾注法 液体稀释的方法分散细胞，最常用的液体稀释方法为10倍系列稀释，参考下图： 随着稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散。 上海交通大学医学院 倾注法 合适稀释度的菌悬液与灭完菌冷却到50-55°C的培养基混合均匀，倒入无菌培养皿，冷却形成平板后，培养。 操作较麻烦。热敏感微生物的影响明显；影响严格好氧微生物的生长；表面菌落与培养基内菌落形态影响菌落形态的判别。 分散均匀，计数准确。 上海交通大学医学院 细菌学标准 革兰阴性杆菌落计数﹥105cfu/ml或革兰阳性球菌菌落计数﹥104 cfu /ml，应同时报告鉴定结果及药敏试验结果。 菌落计数低于此标准，并不能完全排除尿路感染。这多见于以下几种情况：1.应用抗菌药物；2.采尿时消毒剂混入尿中3.尿频，细菌停留时间短；4.大量输液或使用利尿剂使尿液稀释；5.尿液PH。 上海交通大学医学院 泌尿系统感染常见细菌 大肠埃希菌 上海交通大学医学院 泌尿系统感染常见细菌 铜绿假单胞菌 上海交通大学医学院 铜绿假单胞菌 细长革兰阴性杆菌， 极单鞭毛，严格需氧，氧化利用葡萄糖 蓝绿色水溶性绿脓素和黄绿色青脓素 血平板上形成大而扁平，湿润，边缘不齐，有金属光泽，有生姜气味的灰绿色菌落，并形成透明溶血环 最适生长温度35℃，4℃不生长，42℃生长 MAC 上海交通大学医学院 O/F试验（氧化型） 硝酸盐还原试验（＋） 上海交通大学医学院 泌尿系统感染常见细菌 肺炎克雷伯菌 荚膜染色 上海交通大学医学院 肺炎克雷伯菌粘丝试验 上海交通大学医学院 肺炎克雷伯菌KIA（A A＋- ）、MIU（－－＋） 肺炎克雷伯菌IMViC试验（－－＋＋） 上海交通大学医学院 上海交通大学医学院 泌尿系统感染常见细菌 鲍曼不动杆菌 上海交通大学医学院 鲍曼不动杆菌 严格需氧、无动力、氧化酶阴性、硝酸盐还原阴性的革兰染色阴性球杆菌。 似双球菌，不易脱色，易误认阳性菌； 血平板培养24小时后，菌落半透明到不透明，凸起，边缘整齐，无色素形成； 大多数菌株麦康凯平板上生长良好，呈无色或淡粉红色 上海交通大学医学院 变形杆菌 革兰染色阴性、无芽胞、无荚膜、周身鞭毛、运动活泼、两端钝圆的小杆菌。 0.4～0.6×1.0～3.0微米。兼性厌氧。 普通固体培养基上迁徙生长。自然界中存在极广，健康人和动物的肠道中，条件致病菌。  变形杆菌迁徙生长现象（普通琼脂平板） 变形杆菌菌落特征（MAC） 上海交通大学医学院 变形杆菌KIA（K A+ + ）MIU（+ +/- +） 变形杆菌苯丙氨酸脱氨酶试验（＋） 上海交通大学医学院 根据典型的迁徙现象,迅速分解尿素，苯丙氨酸脱氨酶阳性，KIA为KA++，IMViC为-/++--，可鉴定为变形杆菌。 上海交通大学医学院 泌尿系统感染常见细菌 肠球菌、链球菌、葡萄球菌 上海交通大学医学院 肠球菌 肠球菌：营养要求低，正常寄居皮肤、上呼吸道、消化道和泌尿生殖道，引起的感染有尿路感染、心内膜炎等，罹患者多为老年人、女性、体弱或肿瘤患者。 粪肠球菌所致感染中最为常见的，绝大部分为院内感染。 上海交通大学医学院 葡萄球菌 革兰阳性菌属约占泌尿感染的25％，以葡萄球菌最常见，主要是金黄色葡萄球菌。 表皮葡萄球菌：导管相关。 上海交通大学医学院 不同方法采集的尿标本培养结果评价 标本来源 菌落数CFU/ml 结果评价 清洁中段尿 ＜104 无意义，仅报告菌落数及革兰染色特征，并注明是纯培养或是混合菌生长。 104 ～ 105 纯培养有意义，报告菌落计数和细菌鉴定、药敏试验结果；混合菌生长无意义，仅做革兰染色镜检，并报告镜检结果。 ＞105 纯培养或混合菌生长，其中某种菌落数≥105者有意义，需进行细菌鉴定和药敏试验；4种及以上细菌生长无意义，报告标本污染。 导尿 ＞103 3种以内细菌生长都有意