实验1-小鼠经口染毒LD50测定.pdfVIP

实验二 小鼠急性经口染毒LD50测定 半数致死剂量 （median lethal dose, LD50 ） 指化学物质引起一半受试对象出现死 亡所需要的剂量。 一、实验目的 学习急性毒性试验的实验设计原则 学会经口灌胃技术 学习随机分组方法 掌握主要的LD 计算方法和急性毒性分 50 级标准 二、实验原理 选择健康的实验动物，根据体重按随机分 组的方法，依据LD50的设计原则将实验动 物随机分成数个染毒组 (5组+空白对照)。 一次或24小时内多次给予受试物后，了解 动物产生的急性毒性反应， 观察受试物毒性反应与剂量的关系，求出 半数致死剂量，并进行急性毒性分级。 三、内容 健康小鼠或大鼠的选择，性别辨认； 称重、编号和随机分组方法； 受试化学物溶液的配制； 小鼠的经口灌胃操作技术； 毒性体征的观察、LD 计算的毒性分级。 50 四、材料和试剂 实验动物 健康成年小鼠，雌雄各半 器材 灌胃针、注射器、电子天平等 试剂 受试物（100mg/ml氯化镉）、 苦味酸、品红 五、操作步骤 1.健康动物的选择 2.性别辨认 3.动物称重、编号和分组 4.剂量设置 (380mg/kg、506mg/kg、675mg/kg、 900mg/kg、1200mg/kg、1600mg/kg、 2133mg/kg) 5.受试物配制(100mg/ml氯化镉) 6.灌胃操作（等体积） 7.毒性观察，死亡动物数记录 3.动物编号、称重和分组 ⑴编号标记（染色标记法） 品红（红色）、苦味酸（黄色）的 酒精饱和溶液在动物被毛上染色。 红的记为十位数,黄色记为个位数, 那么右后腿黄斑，头顶红斑，则表 示是49号鼠 ⑵ 称重（称量纸或滤纸、烧杯） 按序号逐一给老鼠称重，记下相应号码 的老鼠重量（0.00g），按由轻到重的顺序 将50只老鼠的序号分别写在编号上（即重 量由最轻的第一个到最重的第50个，这样 刚开始编的序号就会逐一确定在“编号”栏 ）最好将重量记在最下面的一栏里，这样 好配制受试物。 称重和编号注意事项： 先编号（雌性1-25，雄性26-50）； 再称重;并记录每个号和对应的重量；等 标号干后再放入笼中，以免鼠间摩擦使 编号不清。 ⑶随机分组 随机数字的获取方法： f（x）=RAND()*100 同性别同一组动物体重差异应小于平 均体重的10% 不同组间的平均体重差异应小于5% 动物随机分组(随机数字表法) 编号* 8 10 22 46 6 11 14 24 25 31 37 40 42 36 21 17 44 27 35 30 随机数 92 38 70 96 92 52 06 79 79 79 45 82 63 18 27 44 69 66 92 19 除数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 - 余数 2 3 0 1 2 组别 乙 丙 戊 甲 丁 重量 受试物 * 小鼠的编号是按体重由轻至重排序后填到表中的 甲 乙 丙 丁 戊 1 2 3 4 0 6.灌胃操作（等体积，1ml） 受试物配置：母液+生理盐水=1ml 母液量ml= 鼠重(kg) ×吸取药剂量(剂量 组量mg/kg ÷100mg/ml) 氯化镉小鼠经口染毒死