第五章 还原糖分的测定.docVIP

第五章 还原糖分的测定 还原糖通常是指具有还原性的糖类。在糖类中，凡具有醛基或酮基的单糖(如茄萄精、果树等)和具有潜醛基的双糖(如麦芽糖、乳精等)都有还原性。蔗糖是由1分子葡萄糖和1分子果糖去水缩合而成的双糖。因不含潜醛基，故没有还原性。但蔗糖在酸或酶的作用下，可水解生成1分子葡萄糖和1分子果糖(此种混合物称为转化糖)。其它的双糖、三糖乃至如糊稻、淀粉等多焙类，都可通过水解而生成相应的单糖。因此测定样品水解液的还原糖含量就可求得样品中相应糖类的含量。因此，还原糖的测定是一般糖类定量的基础。 在制糖工业中，从原料、中间制品到成品，或多或少都含有还原糖．其中，主要是含葡萄糖和果糖。这些物料的还原糖含量及其变化情况是值得重视的。因为，它在一定程度上可以反映原料和产品的质量以及制糖生产过程是否正常．例如：测定甘蔗的还原糖分可了解甘蔗的成熟度；分析保藏甜菜的还原糖分可了解甜菜是否变质；在生产过程中，糖汁在酸性情况下加热，蔗糖会发生水解而使还原糖增加；在强碱性情况下，还原糖容易分解，共分解产物使糖汁颜色加深，影响产品质量。白砂糖中还原糖含量高时，会降低其贮存性．因此，还原糖分的测定是制糖工业分析的一个重要项目。 还原糖分是指物料中含还原糖的重量百分数。在糖厂的物料中，除还原搪外，还含有其他具有还原性的物质。一般分析方法未能把还原糖与其他还原性物质加以区分，故测得的结果是物料中还原性物质的重量百分数，而以相当量的转化糖来表示． 测定还原糖的方法甚多。其中最常用的方法是以铜盐碱性溶液与还原糖的作用为基础的。如兰—艾农法、典夫奈尔法、克奈特—阿连法等。也有基于还原糖能还原某些显色剂，通过比色测定还原糖含量的。例如埃默利希法。此外，还有用色谱法、酶法定量还原糖的。 第一节 兰—艾农(Lane—EyMon)法 (一)基本原理 此法基于贸林试剂与还原糖的氧化还原反应。贸林试剂是一种铜盐的碱性溶液，由硫酸铜、酒石酸钾钠和氢氧化钠组成。 在测定中，所起的反应如下： 或 兰—艾农法是—种容量分析法。它是在煮沸的情况下，用含还原糖的样液滴定一定量的费林试剂。因定量的费林试剂中Cu2+量为一定，只能与相当量的还原糖起作用。为了判别终点，加入四甲基蓝作指示剂。四甲基蓝本身也是一种氧化剂，但其氧化能力较Cu2+弱，所以还原糖先把Cu2+全部还原以后，过剩的才与四甲基蓝作用，使之由蓝色变为无色。此即为滴定的终点. 四甲基蓝的变色反应如下： 上述反应是可逆的，当无色的四甲基蓝与空气中的氧结合时，又变为蓝色。所以滴定时不要离开热源，使溶液保持沸腾， 让上升的蒸汽阻止空气侵入溶液中。 由于此法是用四甲基蓝作为指示剂，所以，兰—艾农法又称为四甲基亚法。 从前面所列的反应式可知，还原糖与费林试剂作用的结果是生成氧化亚铜的红色沉淀。 1分子葡萄糖可以将6个二价铜离子还原为一价铜离子。但实验结果证明： 1分子葡萄糖只能将5个多二价铜离子还原，而且随条件而改变。正是由于多方面因素的影响，因此，不能根据上述反应式直接计算出还原糖员，而是用实验方法制出还原地检索表。在测定物料还原糖时，应严格遵照制表时所规定的条件(例如铜此碱性溶液的成分、用量、还原糖的种类以及加热温度和时间等)，并根据指定的还原糖分检索表进行汁算。 (二)试 剂 (1)费林试剂 费林甲掖：称取69．278克结晶硫酸铜(CuSO4，溶解后，移入1000毫升容员瓶中，加水至标线，用水摇匀，过滤即可 费林乙液：称取346克酒石酸钾钠(NaKC4H4O6·4H2O)溶于约500毫升水小；另称取氢氧化钠l00克镕于约200毫升水中。 将二者混合，移入l000毫升容员瓶中，加水至标线。放置两日，如液面降低，须再加水至标线，然后揭匀，过滤即成。 在本法中，费林试液的含铜量是定量还原糖的关键。在配制时CuSO4·5H2O的量要称桩确。甲液和乙液要分别配配置，事先不能将其混合贮存。原因是：在碱性溶液中，硫酸铜会变成氢氧化铜，氢氧化铜在碱性溶液中，又会慢慢地被酒石酸钾钠还原，而析出氧化亚铜。费林试液乙液中的氢氧化钠是使溶液呈碱性的，因为二价铜离子作为氧化剂是要在碱性情况下进行的，其反应速率是随碱性增强硕加快。所以，加入的氢氧化钠以不含碳酸盐为宜。酒石酸钾钠的作用是使铜离子形成稳定的可溶性的酒石酸钾钠铜络合物，以利于反应顺利进行。如果没有酒石酸钾钠试剂。也可用甘油代替，但测定的结果会偏高些。 由于费林试剂中的铜量是定量还原糖的关键，而铜量与费林试剂的浓度及用量有关，故目前统一规定l0毫升费林试剂(其中5毫升甲液和5毫升乙液)用0.200％转化糖液滴定，若耗用转化糖液为25．64毫升(实验数据)时，该费林试剂的浓度为1个“当量”。如果试剂很纯，又严格按照规定配制，则