微生物遗传学三.pptxVIP

第五节 微生物的诱变育种;一、诱变育种中的几个原则;（一） 出发菌株（original strain）;（二） 菌悬液的制备;（三）诱变剂的选择及处理方法;2. 剂量的选择;3. 诱变处理方法;（四） 中间培养（CM，培养过夜）;（五）突变株的筛选;诱变育种的基本原则：;二、几种重要突变株的筛选方法; 1. 抗性突变株的筛选 （1）抗终代谢物结构类似物的突变株 用途：筛选相应代谢物的高产菌株 （2）抗药性突变株 用途：筛选相应药物(抗生素) 的高产菌株或遗传标记制作 筛选的方法: a. 高于临界浓度的平板进行分离； b. 梯度平板法 ;2. 营养缺陷型突变株的筛选;三种遗传型：;（2）筛选步骤（5步）;①中间培养;;④ 营养缺陷型的鉴定; a. 不含维生素的酪素水解液或氨基酸混合液或蛋白胨 b. 水溶性维生素混合液 c. 0.1%碱水解酵母核酸液;以氨基酸缺陷为例进行说明 将18种氨基酸按右表分为6组 特点：每2组只有一种共同物质;（3）营养缺陷型的用途 生产菌 (氨基酸、核苷酸、维生素等高产菌需求)； 研究代谢途径和杂交、转化等遗传规律的遗传标记。 ; 诱变育种的程序：实验讲义p174 出发菌株（纯化） 前培养（ CM ，培养至对数期） 菌悬液制备 活菌计数 诱变预备实验（剂量存活率曲线） 诱变处理（相对杀菌率为70-75%，30-70%） 活菌计数 中间培养（CM，培养过夜，克服表型延迟） 突变株分离 初筛 复筛 生产性能试验 菌种（鉴定与）保藏; 1. 从生产中选育 2. 定向培育优良品种 一般指用特定因素长期处理微生物群体，同时不断地对它们进行移种传代，以达到积累并选择相应的自发突变株的目的。 例：卡介苗（牛型结核分枝杆菌的减毒活菌苗）;第六节 原核生物的基因重组;基因重组（gene recombination）： 将两个不同性状个体的基因通过一定的方式转移到一起，并发??重新组合，产生新的遗传性状的过程，称为基因重组(gene recombination)或遗传重组。 重组：遗传物质在分子水平上发生的交换； 杂交：在细胞水平上遗传物质的交换. 杂交必然包含着重组，但重组不仅限于杂交这一形式。;;;原核生物的基因重组类型 ;一、 转化（transformation）;自然遗传转化（natural genetic transformation）;进行自然转化，需要二方面必要的条件： ;感受态的机理研究：;2. 转化模型;(2) 转化过程