免疫血清制备.pptxVIP

免疫血清制备;实验目的和要求; ;免疫应答的影响因素;二、宿主方面的因素 1.遗传因素 同种动物不同品系及不同个体对同种抗原产生不同强度的免疫应答。 2.其他因素 年龄、性别与健康状态。 三、免疫原的剂量及进入途径 （1）剂量 1）剂量不足或过多均不引起免疫应答。 2）重复进入引起强免疫应答。 （2）途径：皮内、皮下、肌肉、静脉、腹腔、呼吸道和口服免疫应答水平依次降低。;抗体产生的一般规律;初次应答和再次应答抗体产生比较;实验方案;实验材料;实验流程;1.5mlBSA; 2.动物免疫 用1ml注射器12＃针头吸出完全乳化的抗原1ml； 换4＃针头双后足垫和背部皮下接种，每处约10-20ul。(接种处先用碘酒、酒精消毒) 将免疫后的小鼠放回鼠笼。 1ml注射器（内有乳化好的抗原）贴好标签，4℃保存下次用。 ; 3.采集阴性血清（每班2只） 用无菌小试管收集未免疫小鼠血（眼眶放血法），标记后送准备室； 2,000 rpm离心 10分钟; 吸取血清置1ml塑料管，做好标记; 注意: 老鼠断颈椎处死后放到楼梯口的红桶;第二次课内容;抗原抗体反应;抗原抗体结合力;抗原抗体的亲和力和亲合力;亲水胶体转化为疏水胶体;抗原抗体反应的一般规律;适比性：适合的比例，反应才可见； 阶段性：不可见 可见反应； 条件依赖性：PH，温度，电解质。;血清制备： 取首次免疫后的小鼠2只，采集血清(方法同上),标记后冻存备用。 再次免疫： 其余小鼠于腹腔和背部皮下注射上次制备的乳化抗原，每鼠注射0.5ml。 ;第三周实验步骤;Thanks!