1.4蛋白质工程的崛起课件16742.ppt

1.4 蛋白质工程的崛起 “超级植物” 你已经知道了基因工程可应用于动植物遗传育种、人类疾病预防和生态环境保护。 除了这些应用之外，基因工程在其他领域还有哪些应用吗？ 一、蛋白质工程崛起的缘由 1、基因工程的应用 （1）基因工程的实质： 将一种生物的基因转移到另一种生物体内，使后者产生本不能产生的蛋白质，进而表现出新的性状。 在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。 （2）基因工程的不足： 阅读P26.回答:为什么要进行蛋白质工程? 天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的，它们的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。 2、天然蛋白质的不足 3、蛋白质工程的目的 生产符合人类生产和生活的需要的蛋白质。 满足人类生产和生活的需要 例如： 改造 玉米中赖氨酸含量比较低 天冬氨酸激酶 （352位的苏氨酸） 二氢吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺） 天冬氨酸激酶 （异亮氨酸） 二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸） 玉米中赖氨酸含量可提高数倍 改造 改造 许多工业用酶是在改变天然酶的特性后，才使之适应生产和使用需要的。 旁栏思考：对天然蛋白质进行改造，你认为应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？ 应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质改造，主要原因如下： （1）任何一种天然蛋白质都是由基因编码的，改造了基因即对蛋白质进行了改造，而且改造过的蛋白质可以遗传下去。如果对蛋白质直接改造，即使改造成功，被改造过的蛋白质分子还是无法遗传的。 （2）对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作，难度要小得多。 二、蛋白质工程的基本原理 根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行分子设计。 1、目标： 2、原理： 改造基因（基因修饰或基因合成） 蛋白质 三维结构 氨基酸序 列多肽链 基因 DNA 预期功能 分子设计 mRNA 生物功能 转录 翻译 折叠 图1-29蛋白质工程流程图 转录 DNA RNA 翻译 肽链 折叠等 具有空间结构的蛋白质 表达生物特有的功能或性状 天然蛋白质的合成过程 遵循中心法则，并需经过高级空间结构的转变 ３. 途径: 预期的蛋白质功能 设计预期的蛋白质结构 推测应有的氨基酸序列 找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因） 4、前提： 蛋白质的结构和功能 空间结构的测定： X射线晶体衍射法：三级结构 核磁共振 ：了解其构象 （ 一级结构的测定（氨基酸序列）） 蛋白质工程的概念 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。 蛋白质工程的实质是对编码蛋白质的基因进行改造 讨论：1、怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？ 请把相应的碱基序列写出来。 讨论：某多肽链的一段氨基酸序列是： ……-丙氨酸-色氨酸-赖氨酸-甲硫氨酸-苯丙氨酸-…… 丙氨酸：GCU、GCC、GCA、GCG 色氨酸：UGG 赖氨酸：AAA、AAG 甲硫氨酸：AUG 苯丙氨酸：UUU、UUC 每种氨基酸都有对应的三联密码子,只要查一下遗传密码子表,就可以将上述氨基酸序列的编码序列查出来。 GCU（或C或A或G）UGGAAA（或G）AUGUUU（或C） mRNA序列 脱氧核苷酸　序列 2.确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改造目的基因（DNA）？ 确定目的基因的碱基序列后，就可以根据人类的需要改造它，通过人工合成的方法或可以通过基因的定点诱变技术来改变后从基因文库中获取。 蛋白质的改造（对蛋白质改造部位的多少） 大改：设计并制造自然界中不存在的全新蛋白质，使之具有特定的氨基酸序列、空间结构和预期功能 中改：在蛋白质分子中替代某一个肽段或一个特定的结构域 小改：通过基因工程中的定点诱变技术，有目的改造蛋白质分子中某活性部位的1个或几个氨基酸残基，以改善蛋白质的性质和功能 PCR技术是基因定点诱变的常用方法 利用人工合成带有突变点的诱变引物，通过PCR扩增而获得定点突变的基因，再通过基因工程的方法，将突变基因导入受体细胞，经过转录和翻译合成所需的蛋白质。 基因的定点诱变技术是改变蛋白质结构的核心之一 项目 基因工程 蛋白质工程 操作起点 操作对象 过程 目标 结果 联系 目的基因 预期的蛋白质功能 基因 基因 获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与表达 预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→推测核苷酸序列→合成DNA →表达出蛋白质 定向改造生物的遗传特性，获得人类所需的生物类型或生物产品 定向改造或生产人类所需