第9章二氢吡啶类钙通道阻滞药物分析.pptVIP

第九章 二氢吡啶类 钙通道阻滞药物的分析;学习要求：;第一节 结构与性质;硝苯地平;苯磺酸氨氯地平;激活开放钙通道的二氢吡啶类化合物;二、主要理化性质;3. 二氢吡啶环氨基质子解离性;第二节 鉴别试验;ChP2010尼莫地平的鉴别： 取本品约20mg，加乙醇2ml溶解后，加新制的5%硫酸亚铁铵溶液2ml，1.5mol/L硫酸溶液1滴与0.5mol/L氢氧化钾溶液1ml，强烈振摇，1分钟内沉淀由灰绿色变为红棕色。;（二）与氢氧化钠试液反应;（三）沉淀反应;（四）重氮化-偶合反应;二、分光光度法;（二）红外分光光度法;五、色谱法;（二）薄层色谱法;第三节 有关物质的检查; 硝苯地平在光照和氧化剂存在条件下分别生成两种降解氧化产物：;ChP2010硝苯地平有关物质的检查： 避光操作。取本品，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，作为供试品溶液；另取2,6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯(杂质Ⅰ)对照品与2,6-二甲基-4-(2-亚硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯(杂质Ⅱ)对照品，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中各约含10μg的混合溶液，作为对照品贮备液；分别精密量取供试品溶液与对照品贮备液各适量，用流动相定量稀释制成每1ml中分别含硝苯地平2μg、杂质Ⅰ1μg与杂质Ⅱ1μg的混合溶液，作为对照溶液。; 对照高效液相色谱法试验。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(60:40)为流动相；检测波长为235nm。取硝苯地平对照品、杂质Ⅰ对照品与杂质Ⅱ对照品各适量，加甲醇溶解并稀释制成每1ml中各约含1mg、10μg与10μg的混合溶液，取20μl，注入液相色谱仪，杂质Ⅰ峰、杂质Ⅱ峰与硝苯地平峰之间的分离度均应符合要求。取对照溶液20μl，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使硝苯地平色谱峰的峰高约为满量程的50%；;再精密量取供试品溶液与对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液的色谱图中如有与杂质Ⅰ峰、杂质Ⅱ峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，均不得过0.1%；其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液中硝苯地平峰面积（0.2%）；杂质总量不得过0.5%。;第四节 含量测定;;ChP2010硝苯地??的含量测定： 取本品约0.4g，精密称定，加无水乙醇50ml，微热使溶解，加高氯酸溶液（取70%高氯酸8.5ml，加水至100ml）50ml、邻二氮菲指示液3滴，立即用硫酸铈滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，在水浴中加热至50℃左右，继续缓缓滴定至橙红色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硫酸铈滴定液（0.1mol/L）相当于17.32mg的C17H18N2O6。;二、紫外-可见分光光度法;三、高效液相色谱法;测定法 避光操作。取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于尼莫地平10mg)，置50ml量瓶中，加流动相适量，超声处理15分钟使尼莫地平溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，离心10分钟(每分钟3000转)，精密量取上清液5ml，置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取尼莫地平对照品，精密称定，用流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含20ug的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。;第五节 体内二氢吡啶类药物的分析; 人血浆中氨氯地平对映体的固相萃取LC-MS/MS法测定：;样品处理：血浆样品1.0ml，与1.0ml用流动相制备的内标溶液(10 ng/ml)混合后，取1.8ml上载至C18固相萃取柱(萃取柱预先用含2.5%氨的甲醇1.0ml洗涤2次，再用5mmol/L醋酸铵溶液1.0ml冲洗平衡)，分别用5mmol/L醋酸铵溶液1.0ml和水-甲醇(65:35)1.0ml洗涤，再用含2.5%氨的甲醇1.0ml洗脱，洗脱液在60℃下于旋转蒸发器上蒸发至干，残渣物加250μl流动相溶解，吸取100μl注入液相色谱-质谱联用系统进行分析。;色谱与质谱条件 色谱柱为Chiral-AGP柱(150mm×4.0mm，5μm)，流动相为10 mmol/L醋酸铵缓冲液(pH4.5)-正丙醇(99:1)，流速0.9 ml/min，柱温30℃。APCI离子源，温度350℃，辅助气(N2)流速2 L/min，气帘气(N2)压力410kPa流速1.2 L/min，电晕放电电流2?A，正离子选择反应监测(SRM)[M+H]+离子，N2碰撞能量15eV，用于定量分析的离子反应分别为m/z409→238(氨氯地平)和m/z260→116(S-(-)-普萘洛尔)。;SRM氨氯地平的LC-MS/MS离子