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金太阳新课标资源网 第 PAGE 1 页 共 NUMPAGES 3 页 金太阳新课标资源网 教师备课素材：关于克隆 1.植物组织培养中愈伤组织的形成和形态的发生 从一块外植体形成典型的愈伤组织,大致要经历三个时期:起动期?分裂期和形成期? 起动期是指细胞准备进行分裂的时期?由于接种的外植体的细胞,通常都是成熟的细胞,处在静止状态?起动期是通过一些刺激因素(如机械损伤,改变光照强度,增加氧气等)和激素的诱导作用,使外植体细胞的合成代谢活动加强,迅速进行蛋白质和核酸的合成?机械损伤能诱导植物体细胞开始分裂,如伤口会出现愈伤组织?分裂期是指外植体细胞经过诱导以后脱分化,不断分裂,增生子细胞的过程?处于分裂期的愈伤组织的特点是:细胞分裂快,结构疏松,颜色浅而透明? 分化期是指在分裂期的末期,细胞内开始出现一系列形态和生理上的变化,从而使愈伤组织内产生不同形态和功能的细胞?这些细胞类型有薄壁细胞?分生细胞?色素细胞?纤维细胞等等? 外植体的细胞经过起动?分裂和分化等一系列变化,形成了无序结构的愈伤组织?如果在原来的培养基上,继续培养愈伤组织,会由于培养基中营养不足或者有毒代谢物的积累,导致愈伤组织停止生长,甚至老化变黑?死亡?如果要让愈伤组织继续生长增殖,必须定期地(如2~4周)将它们分成小块,接种到新鲜的培养基上,这种愈伤组织就可以长期保持旺盛的生长? 2.克隆及其实质 (1)克隆及克隆分类 克隆是从英文clone音译而来,在生物学领域中,克隆有分子?细胞?个体三个水平的不同含义? ①分子克隆,即DNA克隆?其含义是将某一特定的DNA片段通过重组DNA技术插入到一个载体(如质粒或病毒等)中,并在宿主细胞中自我复制得到大量完全相同的该DNA片段群体? ②细胞克隆,是指一个单一的共同祖先细胞分裂所形成的纯细胞株,其中每个细胞的基因都相同?比如,在脊椎动物体内,当有外源物(如细菌或病毒)侵入时,会通过免疫反应产生特异的识别抗体,产生某一特定抗体的所有效应B细胞群体是一个细胞克隆?细胞克隆是一种低级的生殖方式——无性生殖,生物进化的层次越低,越有可能采取这种繁殖方式,如大多数的微生物采取分裂生殖的方式? ③个体克隆,是指基因型完全相同的两个或更多的个体组成的群体?比如,两个同卵双胞胎即为一个克隆? (2)克隆的实质 克隆:实质上是不改变遗传物质的分子或细胞复制,若这些分子或细胞诱发成为生物体,因其遗传物质不曾发生变化,因此也属于克隆,即大凡从操作对象到操作结果(往往是一个对象变为多个结果)期间未曾改变遗传物质者均应属于克隆? (3)无性繁殖隶属克隆 无性繁殖包括病毒的复制繁殖及细胞生物的分裂生殖?孢子生殖?出芽生殖及营养繁殖,在生殖过程中,都未曾发生遗传物质的改变,因此均符合克隆本质即均隶属于克隆?