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第六章 吸光光度法6.1 吸光光度法的基本原理6.1.1 光的基本性质6.1.2 物质对光的吸收6.1.3 吸光光度法的特点6.2 分光光度法的基本原理6.2.1 光吸收的基本定律6.2.2 吸光光度法的灵敏度6.3 吸光分析法的方法与仪器简介6.3.1 目视比色法6.3.2 吸光分析法6.4显色反应6.4.1 显色剂的选择6.4.2 显色条件的选择6.5光度测量的条件选择6.5.1 测量波长的选择6.5.2 待测溶液吸光度范围的选择6.5.3 参比液的选择6.6 光度分析法的误差6.6.1 偏离朗伯-比耳定律6.6.2 吸光度测量的误差6.7 吸光光度法应用简介6.7.1 微量组分的测定6.7.2 示差光度法6.7.3 络合物组成及稳定常数的测定6.1 吸光光度法的基本原理?10-2 nm 10 nm 102 nm 104 nm 0.1 cm 10cm 103 cm 105 cm?射线x射线紫外光红外光微波无线电波可 见 光吸光光度法 是基于物质对光 选择性吸收的特性而建立的分析方法。可分为比色法和分光光度法。6.1.1 光的基本性质1.光的电磁波性质E:光子的能量(J, 焦耳)? :光子的频率(Hz, 赫兹)? :光子的波长(cm)c:光速(2.9979?1010 cm.s-1)h:Plank常数(6.6256?10-34 J.s 焦耳. 秒)2.光的波粒二象性一定波长的光具有一定的能量。光的折射波动性? ?光的衍射光的偏振光的干涉E粒子性光电效应绿黄绿蓝绿黄橙绿蓝蓝红紫紫红3.单色光、复合光、光的互补单色光单一波长的光由不同波长的光组合而成的光复合光若两种不同颜色的单色光按一定的强度比例混合得到白光,那么就称这两种单色光为互补色光,这种现象称为光的互补。光的互补复合光光谱示意表观现象示意6.1.2 物质对光的吸收1.物质的颜色与光的关系完全吸收完全透过吸收黄色光S3E3S2h?E2 当一束光照射到某物质时,组成该物质的分子、原子或离子与光子碰撞,这些粒子吸收能量,从最低能态(基态)跃迁到最高能态(激发态),这个作用就叫物质对光的吸收。S1E1S0E02.光吸收的原理 光作用于物质时,物质吸收了可见光,而显示出特征的颜色,这一过程与物质的 性质及光的性质有关。物质对光的吸收满足Plank 条件S3Ah?S2E2S1E0S0?E3S2AE1h?h?S1S0? 如测量某种物质对不同波长单色光的吸收程度,以 波长为横坐标,吸光度为纵坐标作图,可得到一条曲 线,称为吸收曲线或吸收光谱 。(1)原子吸收:原子的外层电子选择性地吸收某些波长的电磁波而引起的(锐线光谱)锐线光谱纯 电子能态 间跃迁(2)分子吸收:电子能级跃迁而产生的吸收光谱(带状光谱)带状光谱分子内电子跃迁BAA?A增大C?3.定性分析与定量分析的基础1、定性分析基础物质对光的选择吸收吸收曲线的形状最大吸收波长波峰的个数2、定量分析基础在一定的实验条件下,某物质对光的吸收与物质的浓度成正比,其吸收曲线的形状不会改变,λmax也不会改变。6.1.3吸光光度法的特点较高的灵敏度适当的准确度;(2%-5%)应用范围广;简便,易于操作;6.2分光光度法的基本原理I0It图6.2.1光吸收的基本定律 当一束强度为I0 的平行单色光照射到均匀而非散射的溶液时,光的一部分(其强度为Ia)被吸收,一部分(其强度为It)透过溶液,一部分(其强度为Ir)被器皿的表面所反射,则 I0 = Ia + It + Ir 入射光 I0透射光 ItT = 0.0 %全部吸收全部透射T = 100.0 % 光的反射损失Ir 主要决定于器皿的材料、形状、大小和溶液的性质。在相同条件下,这些因素是固定的,而且反射损失的量很小,故Ir一般可忽略不计,则上式可简化为: I0 = Ia + It 1. 透光率 (透射比)Transmittance透光率定义:T 取值为0.0 % ~ 100.0 %2. 吸光度(A ):表示物质对光的吸收程度,其值为透光度的负对数,即: 吸光度也叫做消光度E或光密度D,吸光度越大表明相应物质对光的吸收程度就越大。3. Lambert-Beer定律,即:保持入色光波长不变,溶液对光的吸收只与溶液浓度和液层厚度有关 K:比例常数,与吸光物质性质,入射光波长及温度,溶剂性质有关当b的单位是cm;c 的单位是mol ·L-1时,可表示如下:式中, ? 为摩尔吸光系数,其单位是 1005001.00.50AT %AC吸光度 与透光率T : 透光率A: 吸光度T = 0.0 %A = ∞TT = 100.0 %A = 0.0T = 36.8 %A = 0.4341.Lamber-
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