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乳与乳制品常规理化指标检验乳糖蔗糖和总糖的检测 YLNB 2.7 一、高压液相色谱法 ( 仲裁法 ) 1. 原理 食品中的多种糖，可利用高压液相色谱法的 μ－碳水化 合物柱或氨基柱将它们分离，用示差折光检测器，检出各糖 液的折光指数，此折光指数与其浓度成正比。 2. 试剂 所有试剂， 如未注明规格， 均指分析纯； 所有实验用水， 如未注明其他要求，均指三级水。 2.1 澄清剂： 硫酸铜， 质量分数 7%。氢氧化钠， 质量分数 4%。 2.2 乙腈。 2.3 标准溶液 2.3.1 标准糖贮备液， 10mg/ml 。 精确称取被测糖的标样 1g，溶于水中， 用水稀释至 100ml 容 量瓶内，定容。 2.3.2 标准糖工作液， 4 mg/ml 。 吸取 4ml 贮备液，置 10ml 容量瓶中，用乙腈稀释至刻度。 3. 仪器 高压液相色谱仪，带碳水化合物分析柱或氨基柱。 4. 方法 4.1 样液制备 精确称取 2g 左右奶粉或 15g 左右液态奶样品，加 30ml 水溶解， 移至 100ml 容量瓶中， 加澄清剂硫酸铜 （4.1 ）10ml ， 氢氧化钠（ 4.1 ）4ml ，振摇，加水至刻度，静置半小时，过 滤。取 4ml 样品母液置 10ml 容量瓶用乙腈定容， 通过 0.45um 过滤器过滤，滤液备用。 4.2 高压液相色谱仪工作条件： 示差折光检测器：氨基柱 流动相：乙腈 / 水 =6/4 流动相流速： 1.0ml/min 4.3 进样 在仪器稳定后，用注射器或进样阀注射 50uL 标准样液 共 4 次，记下保留时间，测定峰高，放弃第一次数据，取后 三者平均峰高值，同样注射样品 50ul 四次得出平均峰高。 5 ． 结果计算 样品中糖含量（ g/100g ）= C H 100 25C H （1） 4 m H m H 1000 10 100 式中： C — 标准糖溶液浓度， mg/ml ； 1 H— 样品中糖的平均峰高； H— 标准糖溶液的峰高； 1 m — 样品的质量， g 。 注：如果需同时测定样品中所含其他糖类，可在标准糖 溶液中加入各种糖 1g，进样如前，记下各种糖保留时间，按 上列公式计算各值。 6. 允许差 同一样品两次测定值之差不得超过两次测定平均值的 5%。 方法二 乳糖、蔗糖和总糖的测定（莱因—埃农氏法） 1．方法提要 乳糖：样品经除去蛋白以后，在加热条件下，直接滴定 已标定过的费林氏液，样液中的乳糖将费林氏液中的二价铜 还原为氧化亚铜。以次甲基蓝为指示剂，在终点稍过量时， 乳糖将蓝色的氧化型次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基 蓝。根据样液消耗的体积，计算乳糖含量。 蔗糖：样品除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解