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第六章 色谱质谱技术在临床检验中的应用(三).ppt 41页

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传统方法 竞争蛋白结合法 手动放射免疫法 高效液相色谱法 现行方法 自动免疫分析法 液相色谱质谱法 分析方法进展 优点 初始投入成本低 检测系统可实现高度自动化,从而缩短了报告周期 在一些重要研究中使用该方法 再现性好 缺点 不能同时测定25OHD2、 25OHD3,不能准确反应25OHD2的含量,造成临床决策失误 某些系统特异性不够,对基质效应敏感,可与非目标物发生交叉反应, 某些系统回收率不高,导致结果产生整体偏倚 每个测试的成本较高 自动免疫分析法 LC-MS/MS法 优点 特异性强,可同时检测25OHD2和25OHD3含量 检测系统可实现半自动化 再现性更好 仪器技术发展迅速,可为检测提供更高的灵敏度和稳定性 缺点 串联质谱检测仪器初始投入成本较高 需要严格训练、技术熟练的检测人员 只有某些大型实验室开展了此项目,限制了在某些国家或区域的应用 LC-MS/MS法 LC-MS/MS法 应用 SRM972a使得方法标准化成为了可能 LC-MS/MS检测25-羟基维生素D的流程 样品类型:血清 检测目标化合物:25OHD2、25OHD3 样品前处理方法: LC-MS/MS检测25-羟基维生素D—前处理 血清 取样 加内标(乙腈溶) 振荡、蛋白沉淀 加正己烷 振荡、萃取 离心 分离 取上清液 氮吹干 复溶、离心 上清液转移至进样瓶 LC-MS检测分析 液相方法: 色谱柱: Proshell 120 EC-C18(2.1×100 mm,2.7 μm) 流动相A:0.1%甲酸水; 流动相B:0.1%甲酸甲醇。 梯度程序: LC-MS/MS检测25-羟基维生素D—仪器检测 离子化模式:ESI or APCI LC-MS/MS检测25-羟基维生素D—仪器检测 化合物 溶解性及极性 分子式 MW 25OHD2 非极性、脂溶性 C28H44O2 412.65 25OHD3 非极性、脂溶性 ?C27H44O2 400.64 ESI与APCI的比较 * CNN—美国有线电视新闻网 1916年,维生素D从鳕鱼肝脏中分离出,后证实有五种化合物,分别为D2、D3、D4、D5和D6,以D3最为重要; D2、D3皆可人工合成,D4为人工合成的D2类似物;D2与D3的生物化学特性及对人的生理功能相似;D4对哺乳动物的作用只有D3或D2的2/3或3/4;D5、D6结构亦类似,对人类无重要性。 植物不含维生素D,但维生素D原在动、植物体内都存在。植物性食物如植物油、蘑菇中所含的麦角固醇须经紫外线照射后变为可被人体吸收的骨化醇即维生素D2。动物性食物如鲑鱼、肝脏、蛋黄、牛奶。 维生素D是钙吸收的保证,但VD缺乏却非常普遍,特别是国内8成以上孕妇维生素D缺乏,一般来说,对我国孕妇来说,在冬季、处于北方、生活在城市、肥胖的孕妇相比夏季、处于南方、生活在农村及不肥胖的孕妇更容易缺乏VD。 DEQAS 是目前全球最具影响力的维生素D 检测的实验室室间质量评价计划,参加的实验室数已经超过1000 家,通过检测该组织发放的血清样本并与同方法组结果进行比较能够很好的反映检测方法的准确性。 第六章 色谱质谱技术在临床检验中的应用 《临床色谱质谱检验技术》 董衡 广州金域临床质谱检测中心技术主管 从事色谱质谱临床应用研究工作6年 掌握: LC-MS/MS在25-羟基维生素D检测中的应用 色谱质谱技术在生化遗传中的应用 色谱质谱技术在治疗药物监测中的应用 色谱质谱技术在内分泌疾病检测中的应用 第六章 色谱质谱技术在临床检验中的应用 一、维生素D介绍 三、LC-MS/MS在25-羟基维生素D的检测中的应用 主要内容 二、临床背景及检测意义 《临床色谱质谱检验技术》 四、治疗和预后 五、小结与思考 一、维生素D介绍 《临床色谱质谱检验技术》 CNN NEW-Top 10 Medical Breakthroughs #10. Benefits of Vitamin D Researchers have long known that the "sunshine vitamin" boosts bone strength by encouraging the body to absorb calcium. But a slew of new studies published in 2007 suggests that the vitamin has a lot of other benefits: Diets high in D may ward off diabetes, gum disease and multiple sclerosis — and maybe even cancer. 维生素D 与维生素D相关的研究超过70,000份文章 维生素

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