组织学与胚胎学-第1章 绪论、细胞2015.ppt

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;HISTOLOGY & EMBRYOLOGY Zhang Lei Dept. of Hist. & Embry. Hebei Medical University;使用的教材;参考书;第1章 绪论 (Introduction);? ;一、 组织学与胚胎学的定义、研究内容及其在医学中的地位;组织学(Histology);器官:各种基本组织按一定的 规律有机地结合在一起. 系统:功能相关的器官组成系 统,完成连续的生理过程.; 胚胎学(embryology) 是研究个体发生、发育机理的科学,主要介绍人胚早期(受精后前8周)发育及各器官、系统的发育过程,在此基础上研究先天畸形的???生机理和预防。其内容包括:受精、卵裂、植入;胎膜、胎盘;器官系统的发生与功能的建立、先天性畸形等。;; 人体组织学与胚胎学属于重要医学基础课,与其它基础与临床学科有着必然、一定联系。;组织学与胚胎学在医学中的地位;二、组织学与胚胎学的研究技术;(一)一般光学显微镜技术 应用光学显微镜观察组织标本(切片)是最常用的方法。;Unit used in microscope 1 mm =1000 um (micron,micrometer) 1 um =1000 nm ( nanometer) Maximum resolution Light microscope: 0.2um; 一般光镜技术 光学显微镜(light microscope,LM)技术 分辩率:0.2μm,放大约1000倍。 光镜结构:观察之前先做组织切片,最常用的为石蜡切片。 ;光学显微镜;组织标本 标本的制作: 组织学标本制作比较复杂,基本包括以下几个步骤:取材、固定、脱水、包埋、切片、染色等。 取材、固定: 为使所获材料的形态结构接近活体状态,故取材要迅速,得到的材料应及时用固定液(fixative) 固定(fixation)。 常用固定液为甲醛、乙醇等,它们可以使蛋白质迅速凝固,防止其分解和变性。 脱水、包埋、切片: 为使组织与包埋剂相融合,所获材料需经乙醇或丙酮脱水; 为便于将材料切成薄片,需将其包埋在石蜡或火棉胶内,然后再用切片机将其切成厚约5~10μm的薄片。 染色: 切片需经染色后方可在显微镜下观察。;Specimen;SECTIONING;苏木精、伊红染色; 染色:增加对比度,常用苏木精-伊红染色(H-E).  嗜酸性(acidophilia) 碱性结构+酸性染料(伊红)呈粉红色        嗜碱性(basophilia) 酸性结构+碱性染料(苏木精)呈蓝紫色  中性 ; ;(二) 激光共焦扫描显微镜(confocal laser scanning microscope) 是一种高光敏度、高分辩率的新型生物学仪器。主要由激光光源、共聚焦成像扫描系统、光学系统和微机图像分析系统四部分组成,还附有外接探测器、彩色显示器和照相装置等。 可以检测、识别组织或细胞内微细结构及其变化,细胞的受体移动,膜电位变化,酶活性以及物质转运,并以激光对细胞及染色体进行切割、分离、筛选等。;LCSM Image of a Xenopus Melanophore microtubule cytoskeleton (green) and the nucleus (blue) itg.uiuc.edu/;(三) 电子显微镜术 电子显微镜(electron microscope,EM),分辩率0.2nm。 单位换算:1mm=1000μm 1μm=1000nm 透射电子显微镜技术(transmission electron microscope,TEM)技术的过程:取材—戊二醛锇酸双固定--脱水(丙酮)--超薄切片(厚50-80nm)--重金属盐染色--观察。电子显微镜下所见的结构称超微结构,被所染部位,荧光屏上显得暗,称为电子密度高;反之称为电子密度低。 ;TRANSMISSION ELECTRON MICROSCOPE,TEM; 2. 扫描电子显微镜技术(scanning electron microscope, SEM) 固定后的标本,在其表面喷镀金,在荧光屏上即可显示细胞或组织表面的立体结构,如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛等。;人类红细胞;人类精子; ???????????????????????????????????????????????????? Figure 3-32. Cells in culture. Scanning electron micrograph of rat fibroblasts growing on th

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