临床微生物检验-支原体.ppt

4.生化反应 分解葡萄糖产酸，根据能否利用葡萄糖、水解精氨酸和尿素与其他致病性支原体区别。 5.抵抗力 对热、干燥、一般化学消毒剂和脂溶剂敏感。 对青霉素、头孢菌素、醋酸铊则有一定的抵抗力。 对作用于胆固醇的药物（二性霉素B等）和干扰蛋白质合成的药物（多西环素、氯霉素、红霉素等）敏感。 检测程序 标本 液体培养基（37℃、CO2环境，1周） 液体澄清，颜色改变 转种于固体培养基（37℃、CO2环境，10天） 低倍镜观察。 微生物学检查 液体固体二步法 微生物学检查 1.标本的采集:  采咽拭子、鼻拭子、痰、支气管分泌物、血清等。其中以拭子为最佳。 2.注意事项： （1）支原体对热、干燥敏感。取材后应立即接种； （2）如不能立即接种可置于蔗糖磷酸盐缓 液，4℃保存72h，-70℃可长期保存。 3.标本直接检查 （１）直接镜检 革兰阴性不易着色。 标本→涂片→ 电镜观察无细胞壁易与细菌区别。 （２）核酸检测：PCR法快速、敏感、特异，操作应防止污染 4.分离培养：慢，阳性率不高对临床快速诊断意义不大，但对 确诊有意义。 5.血清学检查——抗体检测。 （１）ELISA——特异、敏感、快速目前常用而可靠方法可检 测IgM和IgG。 微生物学检查 （2）补体结合试验（CF） （3）间接血凝试验 （4）冷凝集试验——非特异性试验。 （效价≥1：64），效价越高或4×以上升高，近期感染的可能性大。 冷凝集试验：肺炎支原体感染（或淋巴系统恶性肿瘤或传染性单核细胞增多症）后，患者血清中出现冷凝集素（IgM），能在0-4 ℃条件下凝集自身红细胞（37℃时却无此效应）。此凝集实验为非特异性的，仅33-75%患者出现，是肺炎支原体感染的辅助诊断试验。 培养基：牛心消化液为基础，加20%小牛血清、10%酵母浸液、0.5%葡萄糖、酚红指示剂、醋酸铊、青霉素制成液体培养基。 阳性：培养基变黄，液体澄清 阳性 阴性 鉴定 （1）油煎蛋菌落 （2）底物分解：葡萄糖（+） （3）TTC（氯化三苯四氮唑）还原： 无色变粉红色 （4）GIT，MIT 解脲脲原体（Ureaplasma urealyticum,Uu） 1954年从非淋菌性尿道炎（NGU）患者的尿道分泌物中分离出。 性接触和母婴传播为主。是非淋菌性尿道炎中仅次于衣原体（占50%）的重要病原体 。 按其分解尿素的特性命名。 是人类生殖泌尿道常见寄生菌之一，特定条件下致病。 临床意义 Uu多寄生在男性尿道、包皮和女性阴道。 1.最常见引起非淋菌性尿道炎 2. 上行引起男性前列腺炎或附睾丸。 3.女性阴道炎、宫颈炎并导致流产。 4.早产儿及低体重新生儿呼吸道和中枢神经系统感染。 临床意义 致病机制：侵袭性酶（磷脂酶、尿素酶、 IgA蛋白酶）及其毒性产物 5. 解脲脲原体感染与不育有关: 吸附精子表面，阻碍精子运动； 产生神经氨酸酶样物质，干扰卵子与精子结合； 解脲脲原体与精子有共同抗原，溶脲脲原体感染刺激机体产生的抗体对精子产生损伤。 生物学特性 1．形态结构：染色性与结构基本同肺炎支原体，形态以卵圆形多见，大小50-300nm。 解脲脲原体电镜扫描形态（×24000） 2．培养特性 （1）营养要求较高（培养基中含胆固醇酵母尿素等） 最适pH5.5—6.5，生长速度较Mp快。 （2）固体培养基 在5%CO2环境48h 形成15～50μm “颗粒”状或“油煎蛋”样小菌落（放大100倍才能见到） 3．生化反应 不分解葡萄糖和精氨酸，脲酶阳性（分解尿素） 4. 抗原结构 （1）脂多糖抗原 （2）蛋白质抗原 （3）脲酶抗原——种特异性抗原 有16个血清型，第4型频率最高。 5．抵抗力：基本同肺炎支原体。 生物学特性 解脲脲原体的小菌落（tiny strain，T