第五章液相色谱-质谱技术（一）-汪慧-20170401.ppt

液相存在问题 未完全分离？ 定性，结构信息？ 灵敏度？ 液相色谱-质谱技术优势 质谱给出的信息 液相色谱-质谱技术优势 液相色谱-质谱联用中给出的信息 液相色谱-质谱技术优势 液相色谱-质谱技术可解决的问题 定性：结构信息、保留时间 定量：峰面积、峰高 可分析含量极少的化合物 液相色谱-质谱技术优势 与气相色谱-质谱联用的区别？ 液相色谱-质谱技术优势 与气相色谱-质谱联用的区别？ 液相色谱-质谱技术优势 液相色谱-质谱技术 不挥发性化合物分析测定 极性化合物分析测定 热不稳定化合物分析测定 大分子化合物分析测定 没有商品化的标准谱库 气相色谱-质谱技术 最早商品化的联用仪 适宜分析小分子，易挥发、热稳定、能气化的化合物 用电子轰击（EI）得到的谱图，可与标准谱库对比 已知化合物中约80%的化合物是亲水性强、挥发性低的有机物，热不稳定化合物及生物大分子，只能依靠液相色谱进行分离。 液相色谱-质谱技术出现的原因？ 高分离能力 适用广 高灵敏度和高特异性 液相色谱-质谱技术在临床检验领域的主要应用 三、液相色谱-质谱联用仪系统 《临床色谱质谱检验技术》 液相色谱-质谱联用仪的组成 1、液相部分（包括输液系统、进样系统、色谱柱、柱温箱） 2、质谱部分（包括离子源、质量分析器、检测器和真空系统） 3、数据处理系统 数据处理系统 液相部分 质谱部分 强调第四章的重要性 * 鉴别能力强，可给出化合物的分子量、分子结构碎片等信息 * 已知化合物中约80%的化合物是亲水性强、挥发性低的有机物，热不稳定化合物及生物大分子，这些化合物的分析不适宜用气相色谱分析，只能依靠液相色谱。LC和MS联用的推动力——优势互补，应用更广。 液相色谱-质谱联用仪是液相色谱与质谱联用的仪器。它结合了液相色谱仪有效分离热不稳性及高沸点化合物的分离能力与质谱仪很强的组分鉴定能力。是一种分离分析复杂有机混合物的有效手段。 * * 真空系统：机械泵，分子涡轮泵。只有在足够高真空下，离子才能从离子源到达检测器，否则灵敏度低。 * * 若LC洗脱液直接进入质谱的高真空区，则每分钟增加的气体量为上百升。因此，需要一个接口，将洗脱液及样品气化，分离除去大量的洗脱液分子，是样品分子电离。LC流出物如果全部气化，可产生500~1000 ml/min的气体，而MS采样仅能接受10~50 ml/min的气体； * 质谱的发展过程中……，为了解决“接口”问题，人们开始致力于液-质联用接口技术的研究。在开始的20 年中处于缓慢的发展阶段，研制出了许多种联用接口，但均没有应用于商业化生产。直到大气压离子化（atmospheric-pressure ionization, API）接口技术的问世，液-质联用才得到迅猛发展，广泛应用于实验室内分析和应用领域。 /bbs/redirect.php?tid=21150&goto=lastpost * 第五章 液相色谱-质谱技术 《临床色谱质谱检验技术》 一、本章教学要求 二、液相色谱-质谱技术概述 三、液相色谱-质谱联用仪系统 五、小结与思考 《临床色谱质谱检验技术》 主要内容 四、液相色谱-质谱联用中的主要技术问题 一、本章教学要求 《临床色谱质谱检验技术》 目标 掌握： 液相色谱-质谱联用仪的组成及工作原理 液相色谱-质谱联用方法的建立 熟悉： 液相色谱-质谱联用的主要技术问题 了解： 液相色谱-质谱技术发展历史 第五章教学要求 教学形式及学时 理论教学学时：3 第五章教学要求 复习 《临床色谱质谱检验技术》 气相色谱-质谱联用技术优势 质谱作为检测器 气相色谱作为进样系统，将待测样品进行分离后直接导入质谱进行检测 二者优势互补，解决了气相色谱定性的不专一性，使得质谱成为一种兼具通用性，选择性的检测器。 质谱作为检测器，检测的是离子质量，获得化合物的质谱图，对化合物进行定性定量 获得三维信息谱图 气相色谱-质谱技术优势 正癸烷 气相色谱-质谱联用仪的组成及工作原理？ 气相色谱-质谱技术 气相色谱部分 质谱部分 数据处理系统 气相色谱-质谱方法建立流程？ 气相色谱-质谱技术 气相色谱-质谱技术 样品制备 仪器分析 数据处理 气相色谱-质谱方法检测流程 临床GC-MS方法的验证参数？ 方法的精密度（批内、批间）、准确度、分析测量范围、临床可报告范围、分析灵敏度、基质特异性、干扰试验、携带效应、生物样品稳定性、前处理后样品稳定性、方法参考区间的建立与验证 气相色谱-质谱技术 二、液相色谱-质谱技术概述 《临床色谱质谱检验技术》 气相色谱-质谱联用技术的定义？优势？应用局限？ 定义：将气相色谱的分离能力与质谱的鉴定能力结合起来进行定性定量分析的基本分析技术。 优势：既解决了气相色谱定性的不专一性，也解决了质谱