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乳与乳制品病原微生物检验方法志贺氏菌的检验
YLNB 4.4
1. 仪器及器材
1.1 架盘药物天平 :0 —— 500g, 精确至 0.5g
1.2 均质器或灭菌乳钵。
1.3 恒温培养箱： 36 ±1℃，42 ℃
1.4 冰箱
1.5 灭菌广口瓶 :500mL。
1.6 灭菌锥形瓶 :500mL,250mL。
1.7 灭菌平皿 : 直径 90mm
1.8 显微镜： 10×—— 100 ×。
1.9 硝酸纤维素滤膜 :150mm×50mm, 0.45 μm。临用时切成
两张 , 每张 70mm×50mm,
用铅笔划格 , 每格 6mm×6mm。每行 10 格 , 分 6 行。灭菌备用。
2. 培养基和试剂
2.1 CN 增菌液 : 按 GB 4789.28 中 4.17 规定。
2.2 HE 琼脂 : 按 GB 4789.28 中 4.21 规定。
2.3 SS 琼脂 : 按 GB 4789.28 中 4.22 规定。
2.4 麦康凯琼脂 : 按 GB 4789.28 中 4.24 规定。
2.5 伊红美蓝琼脂 (EMB): 按 GB 4789.28 中 4.25 规定。
2.6 三糖铁琼脂 (TSI): 按 GB 4789.28 中 4.26 、4.27 规定。
2.7 葡萄糖半固体管 : 按 GB 4789.28 中 4.31 规定。
2.8 半固体管 : 按 GB 4789.28 中 4.30 规定。
2.9 葡萄糖铵琼脂 : 按 GB 4789.28 中 3.8 规定。
2.10 尿素琼脂 (pH7.2): 按 GB 4789.28 中 3.15 规定。
2.11 西蒙氏柠檬酸盐琼脂 : 按 GB 4789.28 中 3.5 规定。
2.12 氰化钾 (KCN)培养基 : 按 GB 4789.28 中 3.16 规定。
2.13 氨基酸脱羧酶试验培养基 : 赖氨酸、鸟氨酸及对照培养
基 , 按 GB 4789.28 中 3.12 规定。
2.14 糖发酵管 : 棉子糖、甘露醇、甘油、七叶苷及水杨苷 ,
按 GB 4789.28 中 3.2 规定。
2.15 5% 乳糖发酵管 : 按 GB 4789.28 中 4.32 规定。
2.16 蛋白胨水、靛基质试剂 : 按 GB 4789.28 中 3.13 规定。
2.17 志贺氏菌属诊断血清。
3 ． 检验程序
志贺氏菌检验程序如下 :
检 样
25g+GN225ml
36℃±１℃ ,6 －8h
HE 琼脂或 SS 麦康凯或 EME
36℃±１℃ ,18 －24h
挑取可疑菌落
TSI ，葡萄糖半固体
TSI 底层产酸，斜面产碱 ,H 2S－
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