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实验展示
以洋葱为实验材料,提取DNA
DNA断裂, 无法形成絮状沉淀
(三)去除滤液中的杂质
讨论: 1)滤液中的杂质主要是? 2)为什么反复地溶解与析出DNA, 能够去除杂质? 3)方案二与方案三的原理有什么不同?
实验设计
蛋白质
方案二:蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA; 方案三:DNA耐高温而蛋白质不耐高温。
用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。
(四)DNA的析出与鉴定
思考: 1)如何从滤液中析出DNA? 2)纯的DNA应该是什么颜色? 3)如何鉴定DNA分子?应注意什么?
实验设计
白色丝状物
用二苯胺试剂,沸水浴;做空白对照实验。
利用冷酒精
(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液
讨论: 1)动物细胞如何破碎?其原理是? 2)破碎植物细胞时,加入洗涤剂和食盐的作用是? 3)此步骤获得的滤液可能含有哪些细胞成分?
实验设计
蒸馏水涨破,渗透作用
洗涤剂:瓦解细胞膜 食盐:溶解DNA
DNA、蛋白质、多糖、RNA等
课堂巩固
1.下列哪项不宜选作DNA提取材料的是( ) A.洋葱表皮细胞 B.鲜豌豆种子 C.人的成熟红细胞 D.猪肝 2.实验中NaCl的物质的量浓度为2mol/L和0.14mol/L,分别对DNA有何影响? 前者是溶解DNA,过滤除去不溶的杂质 后者是使DNA析出,过滤除去滤液中的杂质
C
课堂巩固
1.下列哪项不宜选作DNA提取材料的是( ) A.洋葱表皮细胞 B.鲜豌豆种子 C.人的成熟红细胞 D.猪肝 2.实验中NaCl的物质的量浓度为2mol/L和0.14mol/L,分别对DNA有何影响? 前者是溶解DNA,过滤除去不溶的杂质 后者是使DNA析出,过滤除去滤液中的杂质
C
* * * * * * * * * * 【新闻链接】 今年8月,一则新闻一经播出,震惊全国。 甘肃白银系列杀人案告破 课题1 DNA的粗提取与鉴定 学习目标 1)通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。 2)概述DNA的粗提取和鉴定的原理。 3)通过对DNA的粗提取实验过程的设计及操作,锻炼科学的思维方法,培养实事求是的科学态度。 学习重点:DNA的物理化学性质。 学习难点:粗提取的DNA的除杂。 导学案反馈 实验思路 1)DNA应从哪提取? 2)怎样将DNA与细胞中的其他物质分离? 3)怎样鉴定提取物是否为DNA? ⑴ DNA的溶解性 当NaCl浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最小,浓度为2mol/L时,DNA的溶解度最大。 利用这一原理,可以使DNA在盐溶液中溶解或析出。 DNA的特性 2mol/L DNA不溶于酒精 细胞中某些蛋白质溶于酒精 ⑵ DNA不溶于酒精溶液 将DNA与蛋白质进一步分离 (提纯) DNA的特性 ⑶ DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 ① 蛋白酶——水解蛋白质 对DNA没有影响 ② 高 温——大多数蛋白质不能忍受60~80℃ 的高温 而DNA在80℃以上才会变性 ③ 洗涤剂——瓦解细胞膜,去除脂质和蛋白质 但对DNA没有影响 DNA的特性 ⑷ DNA的鉴定 沸水浴 蓝色反应 DNA + 二苯胺 DNA的特性 (一)实验材料的选取 讨论: 什么样的实验材料更适合提取DNA? 实验设计 洋葱 鸡血 哺乳动物的红细胞 香蕉 DNA含量相对较高、材料易得 (二)破碎细胞,获取含DNA的滤液 讨论: 1)动物细胞如何破碎?其原理是? 2)破碎植物细胞时,加入洗涤剂和食盐的作用是? 3)此步骤获得的滤液可能含有哪些细胞成分? 实验设计 蒸馏水涨破,渗透作用 洗涤剂:瓦解细胞膜 食盐:溶解DNA DNA、蛋白质、多糖、RNA等 (三)去除滤液中的杂质 讨论: 1)滤液中的杂质主要是? 2)为什么反复地溶解与析出DNA, 能够去除杂质? 3)方案二与方案三的原理有什么不同? 实验设计 蛋白质 方案二:蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA; 方案三:DNA耐高温而蛋白质不耐高温。 用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。 实验展示
以洋葱为实验材料,提取DNA
DNA断裂,
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