课题1微生物的培养.pptxVIP

课题1 微生物的实验室培养;;1、培养基的分类？;一、基础知识：;液体、固体、半固体培养基;固体培养基：菌落;液体培养基;半固体培养基：;培养基的种类;选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞.使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基. ;天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。 优点：营养成分丰富，培养效果好 缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;;2、培养基配制原则：;3、培养基的营养构成;4、微生物???五种营养要素;无机C源：CO2、碳酸盐，只能被自养微生物利用 有机C源：各种糖类，其次是有机酸、醇类、 脂类和烃类化合物 ;分子态氮：固氮微生物以氮气为唯一氮源 无机态氮：硝酸盐、铵盐几乎所有微生物能利用 有机态氮：蛋白质及其降解产物 a实验室常用牛肉膏、蛋白胨、酵母膏做氮源 b生产用玉米浆、豆饼、葵花饼、花生饼等; 构成微生物细胞以C、H、O、N、P、S六种元素为主，约占细胞干重的95％以上； Ca、K 、Mg、Fe为大量元素，以无机盐阳离子形式被吸收，配培养基要加磷酸盐、硫酸盐。 Zn、Ca、Mn、Co、Mo等微量元素，在微生物培养中有0.1PPM就可以了，自来水原料中已够用，不需另加。 ;水;维生素 氨基酸 碱 基 ;二、无菌技术;　（１）消毒： 　　指使用较为温和的理化方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。（不包括芽孢和孢子）;芽孢;孢子;1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……;1、灼烧灭菌; 最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。 有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用硅胶帽，它们只可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过。 ;1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？;三、大肠杆菌的纯化培养;1．计算 2．称量 3．溶化（定容、调PH）　 4．灭菌 5．倒平板;1.溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热?;3.在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么？; 4.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？;6.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？;2、纯化大肠杆菌;菌落：;平板划线操作;菌落;1.平板划线时不能划破培养基的原因？; 2.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？; 3.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;稀释涂布平板法;;问题讨论;四、课题成果评价 ;菌种的保存;本课题知识小结:;【典例解析】;例2．下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是 A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌 C.培养基和发酵设备都必须灭菌 D.灭菌必须在接种前;巩固检测;配制培养基;问题讨论;