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Please attention!;张文钰
病原生物学与免疫学教研室
sqjcbwm@126.com;一、实验室生物安全;2004年4月，中国疾病预防控制中心科研人员，采用未经论证的非典病毒灭活方法，在不符合防护要求的普通实验室内操作非典感染材料，造成北京、安徽发生非典疫情。
2010年12月，东北农业大学28名师生在“羊活体解剖学实验课”中感染布鲁氏菌病。2011年6月，东北农业大学免去该校动物医学院院长和党支书职务。感染病菌的学生称，羊没有被检疫，被染病的羊那天被几个班级的学生重复使用。;感染的主要原因是：
???护意识不强；
操作失误，防护条件不足。;;病原生物学实验室规则;实验室意外紧急处理办法;二、无菌操作技术 ;（一）细菌的分离培养和接种技术;接种方法;分区划线;;连续划线法;2.斜面接种法：
用于菌种移种，以进一步鉴定
和保存菌种。 ;
3.半固体穿刺接种法：保存菌种或观察细菌的动力和生化反应。
4.液体接种法：用于肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等液体培养基
的接种。
;将上述已接种细菌的培养基置37℃恒温培养箱中孵育18～24h，观察细菌的生长现象。;（二）细菌在培养基上的生长现象;1.细菌在固体培养基中的生长现象;;2.细菌在液体培养基中的生长现象;细菌在液体培养基中的生长现象;3.细菌在半固体培养基中的生长现象;细菌在半固体培养基中的生长现象;三、细菌的形态学检查
形态学检查分类
一、不染色标本检查(活体）
悬滴法
压滴法
二、染色标本检查
单染法：简单染色，一种染料 （美兰染色）
复染法：复杂染色，两种以上染料（革兰染色、抗酸染色）
;革兰染色(Gram stain)
1884年由丹麦医师Gram创立
革兰染色是最常用的一种染色方法，可以将细菌初步分为革兰染色阳性菌和革兰染色阴性菌，在临床上具有非常重要的意义.;目的：;1、通透性学说
2、等电点学说
3、化学学说; 通透性学说; 等电点学说;化学学说;;冲洗;一 一 半 半;图一;无菌操作（接种环灭菌和取菌）
涂片的厚度要适中
染色的时间控制，一一半半
冲洗的方法，不要对着涂片区冲洗
观察后将玻片放入玻片缸中; 意义;细菌的特殊结构（示教） （二毛荚一胞）;菌毛比鞭毛更更细、短、直、硬和多的丝状蛋白附属物，与运动无关，菌毛中空，可分为普通菌毛和性菌毛。
功能：普通菌毛附黏膜，性菌毛传递遗传物质。
;;菌体内部物质缩水（60％）形成圆或卵圆形小体。
功能：芽胞形态辨细菌，
灭菌标准抗力强。;
油镜的使用方法
寻找视野：在使用油镜之前，必须先经低、高倍镜观察，然后将需进一步放大的部分移到视野的中心。
增大光照强度：将聚光器上升到最高位置，光圈开到最大。
转高倍镜头、滴加镜油、换油镜头：转动转换器，使高倍镜头离开通光孔，在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢转动油镜，在转换油镜时，从侧面水平注视镜头与玻片的距离，使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。;;物 镜; 实验报告 在封皮上标注班级和第4实验室;作业重点
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