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电镜和光镜的区别 电镜 光镜 光源 电子束 可见光为光源 透镜 电磁透镜 玻璃凸透镜 成像原理 在电镜中，作用于被检样品的电子束经电磁透镜放大后达到荧光屏上成像或作用于感光胶片成像。其电子浓淡的差别产生的机理是，电子束作用于被检样品时，入射电子与物质的原子发生碰撞产生散射，由于样品的不同部位对电子有不同的散射度，故样品电子像以浓淡呈现 而光镜中样品的物像以亮度差呈现，它是由被检样品的不同结构吸引光线多少的不同所造成的。 功能用途 包埋好的组织块放入超薄 切片机切成50~100nm厚的超薄标本片，观察标本的亚显微结构。 而光镜观察的标本则一般置于载玻片上，如普通组织切片标本、细胞涂片标本、组织压片标本和细胞滴片标本等。 放大倍数 很高 比较低 SEM扫描电镜 TEM投射电镜 结构 电子光学系统：电子枪，聚光镜，扫描线圈。 信号收集，处理，显示系统： E-T探测器， 电子光学系统：电子枪，聚光镜 成像系统：物镜，中间镜，投影镜 观察与记录系统:相机，底片，屏 真空系统：延长灯丝寿命，提高图像质量 成像原理 　在一定的真空度下，电子枪发射具有一定能量的电子束，电子束经三级透镜和光阑后，会聚为直径只有5-50nm的电子探针，电子探针受扫描线圈作用，在样品表面作栅状扫描；同时，电子探针与样品相互作用而产生多种信号电子；信号电子被探测器收集、处理，得到荧光屏上显示的样品表面的放大图像。 在一定的真空程度下，电子枪发射具有一下能量的电子束，电子束经聚光镜和光阑作用后会聚到样品表面，产生透镜电子和散射电子，透射电子和部分散射电子通过物镜参与成像。图像经过中间镜和投影镜放大后显示在荧光屏或底片上，成为清晰可辨的放大图像。 样品制备 喷金（为使样品导电，在表面喷金），要求厚度一致，镀层薄，稳定性好 取材要点：快，小，冷，组织新鲜，超薄切片染色（醋酸双氧铀染胞核，枸橼酸铅染胞浆） 用途 表面结构观察 内部结构观察 放大倍数 几十倍~几万倍 几千倍~几万倍 方法 优点 缺点 适用范围 SYBR Green I方法 适用性广、灵敏、方便、便宜 引物要求高，易出现非特异性带不能进行多重定量 适合科研中对各种目的基因定量分析，基因表达量的研究，转基因重组动植物研究 TaqMan 方法 特异性高、重复性好、多重定量 价格高，只适合特定目标 病原体检测，疾病耐药基因研究,药物疗效考核，遗传疾病的诊断