水中总氮的测定(标准操作规程作业指导书).docVIP

1．适用范围 本测定规程规定了碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定水中的总氮。 当样品量为10ml时，本方法的检出限为0.05mg/L，测定范围为0.20~7.00mg/L。 2．测定原理 在120－124℃下，碱性过硫酸钾溶液使样品中含氮化合物的氮转化为硝酸盐，采用紫外分光光度法于波长220nm和275nm处，分别测定吸光度A220和A275，按下面公示计算校正吸光度A，总氮（以N计）含量与校正吸光度A成正比。 A=A220-2A275 3．仪器设备 3.1 紫外分光光度计：配有10mm石英比色皿。 3.2　高压蒸汽灭菌器：最高工作压力不低于1.1~1.4kg/cm2,；最高工作温度不低于120~124℃。 3.3　玻璃具塞比色管：25ml。 3.4 分析天平：精度0.01g。 3.5　一般实验室常用仪器和设备。 4．试剂 除另有说明，分析时均使用符合国家标准的的分析纯试剂，试验用水为蒸馏水。 4.1 蒸馏水。 4.2 碱性过硫酸钾溶液：称取10.0g过硫酸钾（进口试剂）溶于150ml水中（可置于50℃水浴中加热至全部溶解）；另称取3.75g氢氧化钠溶于75m水中。待氢氧化钠溶液温度冷却至室温后，混合两种溶液定容至250ml，存放于聚乙烯瓶中。可保存一周。 4.3 (1+9)盐酸溶液：取100ml浓度为1.19g/ml的盐酸于900ml蒸馏水中混匀。 4.4 (200g/L)氢氧化钠溶液：称取20.0g氢氧化钠溶于少量水中，用水稀释至100ml。 4.5 (20g/L)氢氧化钠溶液：取200g/Ｌ氢氧化钠溶液10.0 ml，用水稀释至100ml。 4.6 浓硫酸：ρ（H2SO4）=1.84g/ml 4.7 (1+35)硫酸溶液：取浓硫酸25ml慢慢边搅拌边倒入875ml水中。 4.8 总氮标准溶液：10μg/ml。 5．样品制备 取适量样品用20g/L氢氧化钠或（1+35）硫酸溶液调节pH值至5~9，待测。 6．分析测定 6.1校准曲线的绘制： 取标准曲线各浓度点0.00、0.20、0.50、1.00、3.00、7.00ml的标准溶液于6支25ml玻璃具塞比色管中，加水稀释至10.00ml，再加入5.00ml碱性过硫酸钾溶液，塞紧管塞，用砂布和线绳扎紧管塞，以防弹出。将比色管置于高压蒸汽灭菌锅中，加热至顶压阀吹气，关阀，继续加热至120℃开始计时，保持温度在120-124℃之间50min。自然冷却开阀放气，取出比色管冷却至室温，按住管塞将比色管中的液体颠倒混匀2－3次。每个试管分别加入1.0 ml（1+9）盐酸溶液，加水稀释至25ml标线，盖塞混匀。使用10mm石英比色皿，在紫外分光光度计上，以水作参比，分别于波长220nm和275nm处测定吸光度。 以总氮（以N计）含量（μg）为横坐标，对应的Ar值为纵坐标，绘制校准曲线。 Ab=Ab220-2Ab275 As=As220-2As275 Ar=As-Ab 式中：Ab-零浓度（空白）溶液的校正吸光度； Ab220-零浓度（空白）溶液于波长220nm处的吸光度； Ab275-零浓度（空白）溶液于波长275nm处的吸光度； As-标准溶液的校正吸光度； As220-标准溶液于波长220nm处的吸光度； As275-标准溶液于波长275nm处的吸光度； Ar-标准溶液校正吸光度与零浓度（空白）溶液校正吸光度的差。 6.2 样品的测定： 量取10.00ml试样至25ml比色管中，按照6.1步骤进行测定。 注：试样中的含氮量超过70μg时，可减少取样量并加水稀释至10 ml。 6.3空白试验： 用10.00ml水代替试样，按照6.2步骤进行测定。 7．结果计算与表示 将分析结果带入公式计算。 ρ=（Ar-a）*f/bV 式中： ρ-样品中总氮（以N计）的质量浓度，mg/L； Ar-试样的校正吸光度与空白试样校正吸光度的差； a-校准曲线的截距； b-校准曲线的斜率； V-试样的体积，ml； f-稀释倍数。 当测定结果小于1.00mg/L时，保留到小数点后两位；大于等于1.00mg/L时，保留三位有效数字。 8．质量保证与质量控制 8.1样品测定前要用(20g/L)氢氧化钠溶液或(1+35)硫酸溶液调pH值至5~9。 8.2过硫酸钾需要高纯的，可用国产优级纯的经重结晶纯化，也可以买默克或西格玛等进口试剂。碱性过硫酸钾溶液在配制过程中，温度过高会导致过硫酸钾分解失效，因此要控制水浴温度在60℃以下，待氢氧化钠溶液温度冷却至室温后，再将其与过硫酸钾溶液混合，定容。 8.3测定应在无氨的实验室环境中进行，避免环境交叉污染对测定