2三聚氰胺的检测液相法知识分享.ppt

检测_样品预处理 洗脱液于50℃下用氮气吹干，残留物用1mL流动相（或20%甲醇水溶液）溶解，涡旋混合1min，供液相测定用。 检测_色谱条件 色谱柱：C18或C8柱，或同等性能的柱子；4.6mm×250mm，5μm。 流动相：称取2.02g庚烷磺酸钠和2.10g柠檬酸于1L容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度。取该溶液900ml加入100ml乙腈，混匀。 三聚氰胺的检测（液相法） 三聚氰胺 —物理与化学性质 三聚氰胺 分子式： C3H6N6 分子量：126.15 英文名：Melamine 三聚氰胺 俗称蜜胺、蛋白精，又叫2 ,4 ,6- 三氨基-1,3,5-三嗪、1,3,5-三嗪-2,4,6-三胺、2,4,6-三氨基脲、三聚氰酰胺、氰脲三酰胺。 是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，是一种重要的有机化工原料。 三聚氰胺 三聚氰胺性状为纯白色单斜棱晶体，无味，密度1.573g/cm3 (16℃)。 在水中溶解度随温度升高而增大,在20℃时，约为3.3 g/L，即微溶于冷水，溶于热水，极微溶于热乙醇，不溶于醚、苯和四氯化碳，可溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等。 三聚氰胺 遇强酸或强碱水溶液水解，胺基逐步被羟基取代，先生成三聚氰酸二酰胺，进一步水解生成三聚氰酸一酰胺，最后生成三聚氰酸。 三聚氰胺 ——检测过程 检测_选择方法 原料乳与乳制品中三聚氰胺的检测方法：GB/T22388-2008 饲料中三聚氰胺的测定：NY/T1372.29-2007 检测_试剂 甲醇：色谱纯。 乙腈：色谱纯。 氨水:浓度25%--28%。 三氯乙酸溶液10g/L：称取10g三氯乙酸加水至1L。 乙酸铅溶液(22g/L):称取22g乙酸铅,用约300mL水溶解后定容至1L。 氨水甲醇溶液：量取5ml氨水，溶解于100ml甲醇中。 20%甲醇溶液：200ml甲醇加入800ml一级水中，混匀。 方法所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂，水为蒸馏水或同等纯度水，溶液为水溶液。 检测_标准品 三聚氰胺标准品（纯度＞99%）。 检测_标准品 标准储备液 准确称取100mg（精确到0.1mg）三聚氰胺标准品于100mL容量瓶中，用20%甲醇水溶液溶解并定容至刻度，配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液，于4℃避光保存。 检测_标准品 标准品中间液 精确吸取标准储备液5.00mL于50mL容量瓶中，用20%甲醇水溶液定容至刻度，配制成浓度为100 μg/mL 的溶液，于4℃避光保存。 检测_标准品 标准品工作液 精确吸取标准中间液0.50mL、 1.00mL、 2.00mL、 5.00mL、 10.00mL于5个100 mL 容量瓶中，用20%甲醇水溶液定容至刻度.于4℃避光保存。 检测_标准品 三聚氰胺 储备液 1000 中间液 100 工作液 0.5 1.0 2.0 5.0 10 单位 μg/mL 检测_标准品 标准工作液浓度可根据所测样品中的具体含量调整。 如果只做单点标样，请选择与样品浓度最接近的一个点。 检测_标准品谱图 检测_标准品曲线 检测_样品预处理 原理： 样品沉淀脂肪和蛋白质，调PH至中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。 检测_样品预处理 准确称取6～10g样品于50ml容量瓶中。 加入三氯乙酸溶液约20ml，要徐徐加入，并摇动容量瓶，超声提取10-20分钟，加入2ml乙酸铅溶液，用三氯乙酸溶液稀释至刻度。 静置30分钟，用滤纸过滤，滤液（如不需净化）经滤膜(0.45μm)过滤，滤液供液相测定用。 检测_样品预处理 如需净化，按以下步骤操作: 小柱活化：依次用3mL甲醇和3mL水活化小柱。 上样：准确吸取10mL（可根据实验情况调整）滤液转移至固相萃取柱中。 检测_样品预处理 净化：再用3mL水和3mL甲醇分别洗涤，抽至近干。 洗脱：用6mL氨化甲醇溶液洗脱，收集全部洗脱液。 控制流速在1mL/min以内。