梅毒螺旋体抗体定量测定作业指导书.doc

梅毒螺旋体抗体定量测定作业指导书 目的：规范梅毒螺旋体抗体测定的标准操作程序，确保梅毒螺旋体抗体测定的结果准确 有效。 二、适用范围：在AutoLumo A2000化学发光检测仪上定量测定人血清中的梅毒螺旋体抗体。 三、临床意义 梅毒是梅毒螺旋体（Treponema pallidum，TP）引起的一种性传播疾病[1]，人是梅 毒螺旋体的唯一宿主。梅毒具有较强的传染性和慢性复杂的病理，它几乎可以引起全身 所有系统的组织和脏器的损害及病变[2]，导致功能失常，组织破坏，乃至死亡。2009 年，梅毒报告病例数在我国甲乙类传染病报告中居第三位[3]，其病程漫长，危害严重， 早期侵犯生殖器和皮肤，晚期侵犯全身各器官，尤其是心血管和中枢神经系统[4]。TP 不仅严重损害成人身体的健康，同时还可由母体经胎盘垂直传播给胎儿，侵犯胎儿肝、 脾、肾上腺、牙齿、骨骼、眼及脑神经等全身器官系统，引起早产、流产、死胎、畸胎、 或胎传梅毒儿（又称先天性梅毒）[4]，严重影响出生人口质量。梅毒螺旋体抗体是梅毒 感染人体后由免疫系统产生的特异性抗体，是梅毒感染的特异性指标。 四、方法原理 本产品采用双抗原夹心法原理进行检测。用TP抗原包被磁微粒，辣根过氧化物酶 标记TP抗原制备酶结合物，通过免疫反应形成抗原-抗体-抗原-酶复合物，该复合物催 化发光底物发出光子，发光强度与TP抗体的含量成正比。 五、标本的采集与处理 5. 1.采用正确医用技术收集血清样本（详见标准血液标本前处理流程）。 5.2.样本中勿添加叠氮钠作为防腐剂。 5.3.样本中的沉淀物和悬浮物可能会影响试验结果，应离心除去，并确定样本未变质方可使用。 5.4.样本处理、收集后在室温放置不可超过8小时；如果不在8小时内检测需将样本放置在2～8℃的冰箱中；若需48小时以上保存或运输，则应冻存于-20℃以下，避免反复冻融。使用前恢复到室温，轻轻摇动混匀。 六、标本拒收标准 1）严重溶血、脂血 2）标本标识不明 七、仪器与材料 7.1.仪器：适用于Lucy2、Lumo、AutoLumoA2000化学发光检测仪。 7.2.试剂：AutoLumo A2000专用梅毒螺旋体抗体试剂 7.2.1.试剂准备：本试剂为即用型试剂，可以直接放在仪器上。 7.2.2.试剂盒于2～8℃储存，有效期12个月。 7.2.3.试剂盒应防止冷冻，避免强光照射。 7.2.4.试剂盒开启使用后，2～8℃保存可使用1个月。 7.2.5.试剂盒可适应1周内常温运输，运输过程中应轻拿轻放，避免重压，防止雨雪淋湿和阳光曝晒。 7.2.6.试剂机载稳定性 7.2.6.1.试剂包（磁微粒混悬液、酶结合物、样品稀释液）竖直向上存放，在2～10℃环境下冷藏保存2小时后，才可上机使用。首次使用后，机载或在2～10℃环境下稳定期为28天。 7.2.6.2.校准品开瓶后保存于2～8℃，稳定期可维持1个月；若需使用更长 时间，应根据需要进行分装，于-20℃冻存（可以保存2个月），但应避免反复冻融。 7.2.6.3.试剂在2～8℃保存可稳定至标签上所标示的有效期。 7.3.质控液：推荐使用安图配套质控品或第三方质控品BioRAD QC 八、检验方法 8.1.消耗品检查： 8.1.1.根据仪器说明装载或检查消耗品是否充足。 8.1.2.参考相应的仪器系统操作说明。 8.2.试剂包装载： 8.2.1.试剂包首次上机前，轻轻地倒转试剂包多次以混合新试剂包内的成分，避免产生气泡。不要倒转已经打开的试剂包。 8.2.2.仪器通过扫描试剂包条码自动获得测试所需的参数。 8.2.3.如果特殊情况下仪器无法识别条码，可以手工输入。 8.2.4.参考相应的仪器系统操作说明。 8.3.测试： 8.3.1.将样本容器放置在仪器配套样本架中，每次测试样本量为50μl。 8.3.2.装载样本架，在仪器软件界面中输入样本信息。 8.3.3.选择“运行”开始测试，系统自动进行试验操作。 8.3.4.参考相应的仪器系统操作说明。 8.4.定Cutoff值： 8.4.1.仪器通过扫描条码卡自动获取测试