丙型肝炎病毒IgG抗体定量测定作业指导书.doc

丙型肝炎病毒IgG抗体定量测定作业指导书 目的：规范丙型肝炎病毒IgG抗体测定的标准操作程序，确保丙型肝炎病毒IgG 抗体测定的结果准确有效。 适用范围：在AutoLumo A2000化学发光检测仪上定量测定人血清中的丙型肝炎病毒 IgG抗体。 三、临床意义 丙型肝炎是一种广泛流行的病毒性疾病，据 WHO调查，全世界估计有1.7 亿人感染丙型肝炎病毒 (HCV)，在不同的国家慢性丙型肝炎病毒感染的流行 病学统计是在 0.5％～20％，我国一般人群抗 HCV阳性率为3.2％。而急性 丙型肝炎绝大多数都会形成有慢性感染的过程，慢性丙型肝炎病毒感染是肝 硬化和肝癌的主要原因之一[1,2]。 丙型肝炎的诊断有赖于 HCV抗体的血清学检定及病毒学检测。HCV抗体 阳性代表机体对病毒感染的应答，一般在感染 1～2月后出现抗体，急性和 慢性丙型肝炎的区别在于 HCV核心 IgG量的差异，慢性病人的 IgG抗体水 平比急性的要高些，并且通常有更长的免疫活性。通过自然恢复或经治疗清 除病毒的急性丙型肝炎患者，IgG会在几年之后消失或低于检测下限而无法 检出[3]。临床上也应注意到一些血液透析、免疫功能缺陷和自身免疫性疾病 患者可出现抗-HCV假阳性，可以采用抗-HCV RIBA或HCV RNA检测确认，有 助于确诊这些患者是否合并感染HCV。 四、方法原理 本试剂盒采用间接法原理进行检测。以HCV抗原包被磁微粒，辣根过氧 化物酶标记的抗人IgG制备酶结合物，通过免疫反应形成抗原－抗体－酶标 记抗体复合物，该复合物催化发光底物发出光子，发光强度与HCV IgG抗体 的含量成正比。 五、标本的采集与处理 5. 1. 采用正确医用技术收集血清样本（详见标准血液标本前处理流程）。 5.2. 样本中勿添加叠氮钠作为防腐剂。 5.3. 样本中的沉淀物和悬浮物可能会影响试验结果，应离心除去，并确定样本未变质方可使用。 5.4. 样本处理、收集后在室温放置不可超过8小时；如果不在8小时内检测需将样本 放置在2～8℃的冰箱中；若需48小时以上保存或运输，则应冻存于-20℃以下， 避免反复冻融。使用前恢复到室温，轻轻摇动混匀。 六、标本拒收标准 1）严重溶血、脂血 2）标本标识不明 七、仪器与材料 7.1.仪器： 适用于Lucy2、Lumo、AutoLumoA2000化学发光检测仪。 7.2.试剂：AutoLumo A2000专用丙型肝炎病毒IgG抗体试剂 7.2.1.试剂准备：本试剂为即用型试剂，可以直接放在仪器上。 7.2.2.试剂盒于2～8℃储存，有效期12个月。 7.2.3.试剂盒应防止冷冻，避免强光照射。 7.2.4.试剂盒开启使用后，2～8℃保存可使用1个月。 7.2.5.试剂盒可适应1周内常温运输，运输过程中应轻拿轻放，避免重压，防止雨雪淋湿和阳光曝晒。 7.2.6.试剂机载稳定性 7.2.6.1.试剂包（磁微粒混悬液、酶结合物、样品稀释液）竖直向上存放，在2～10℃环境下冷藏保存2小时后，才可上机使用。首次使用后，机载或在2～10℃环境下稳定期为28天。 7.2.6.2.校准品开瓶后保存于2～8℃，稳定期可维持1个月；若需使用更长 时间，应根据需要进行分装，于-20℃冻存（可以保存2个月），但应避免反复冻融。 7.2.6.3.试剂在2～8℃保存可稳定至标签上所标示的有效期。 7.3.质控液：推荐使用安图配套质控品或第三方质控品BioRAD QC 八、检验方法 8.1.消耗品检查： 8.1.1.根据仪器说明装载或检查消耗品是否充足。 8.1.2.参考相应的仪器系统操作说明。 8.2.试剂包装载： 8.2.1.试剂包首次上机前，轻轻地倒转试剂包多次以混合新试剂包内的成分，避免产生气泡。不要倒转已经打开的试剂包。 8.2.2.仪器通过扫描试剂包条码自动获得测试所需的参数。 8.2.3.如果特殊情况下仪器无法识别条码，可以手工输入。 8.2.4.参考相应的仪器系统操作说明。 8.3.测试： 8.3