常用溶液配制方法.docVIP

一.常用贮液与溶液 1mol/L 亚精胺（Spermidine）: 溶解 2.55g 亚精胺于足量的水中，使终体积 为 10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L 精胺（Spermine）：溶 解 3.48g 精胺于足量的水中，使终体积为 10ml。 分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L 乙酸胺（ammonium acetate）：将 77.1g 乙酸胺溶解于水中，加 水定容至 1L 后，用 0.22um 孔径的滤膜过滤除菌。 10mg/ml 牛血清蛋白(BSA）：加 100mg 的牛血清蛋白（组分 V 或分子生物 学试剂级，无 DNA 酶）于 9.5ml 水中（为减少变性， 须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血 清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到 10ml，然后分装成小份贮存 于-20℃。 1mol/L 二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇 5g 的原装瓶中加 32.4ml 水，分 成小份贮存于-20℃。或转移 100mg 的二硫苏糖醇 至微量离心管，加 0.65ml 的水配制成 1mol/L 二硫苏糖醇溶液。 8mol/L 乙酸钾（potassium acetate）：溶解 78.5g 乙酸钾于足量的水中， 加水定容到 100ml。 1mol/L 氯化钾（KCl）：溶 解 7.46g 氯化钾于足量的水中，加水定容到 100ml。 3mol/L 乙酸钠（sodium acetate）：溶解 40.8g 的三水乙酸钠于约 90ml 水中，用冰乙酸调溶液的 pH 至 5.2，再加水定容到 100ml。 0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的 Na2EDTA 和 NaOH 溶液（0.5mol/L），混 合后形成 EDTA 的三钠盐。或称取 186.1g 的 Na2EDTA·2H2O 和 20g 的 NaOH，并溶于水中，定容至 1L。 1mol/L HEPES：将 23.8gHEPES 溶于约 90ml 的水中，用 NaOH 调 pH （6.8-8.2），然后用水定容至 100ml。 1mol/L HCl：加 8.6ml 的浓盐酸至 91.4ml 的水中。 25mg/ml IPGT：溶解 250mg 的 IPGT（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于 10ml 水中，分成小份贮存于-20℃。 1mol/LMgCl2:溶解 20.3g MgCl2·6H2O 于足量的水中，定容到 100ml。 P DF 文件使用 pdf Fact or y Pr o 试用版本创建 www. f i nepr i nt . com. cn 100mmol/L PMSF：溶解 174mg 的 PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的异丙醇 中，定容到 10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹 或贮存于-20℃。 20mg/ml 蛋白酶 K（proteinase K）：将 200mg 的蛋白酶 L 加入到 9.5ml 水中，轻轻摇动，直至蛋白酶 K 完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到 10ml， 然后分装成小份贮存于-20℃。 10mg/mlRnase（无 DNase）（DNase－free RNase）：溶解 10mg 的胰 蛋白 RNA 酶于 1ml 的 10mmol/L 的乙酸钠水溶液中（pH 5.0）。溶解后于 水浴中煮沸 15min，使 DNA 酶失活。用 1mol/L 的 Tris－HCl 调 pH 至 7.5， 于-20℃贮存。（配制过程中要戴手套） 5mol/L 氯化钠（NaCl）：溶解 29.2g 氯化钠于足量的水中，定容至 100ml。 10N 氢氧化钠（NaOH）：溶 解 400g 氢氧化钠颗粒于约 0.9L 水的烧杯中（磁 力搅拌器搅拌），氢氧化钠完全溶解后用水定容至 1L。 10％SDS（十二烷基硫酸钠）：称取 100gSDS 慢慢转移到约含 0.9L 的水的 烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至 1L。 2mol/L 山梨（糖）醇（Sorbitol）：溶解 36.4g 山梨（糖）醇于足量水中使 终体积为 100ml。 100％三氯乙酸（TCA）:在装有 500gTCA 的试剂瓶中加入 100ml 水，用磁力 搅拌器搅拌直至完全溶解。（稀释液应在临用前配制） 2.5％ X－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-半乳糖苷）：溶解 25mg 的 X－gal 于 1ml 的二甲基甲酰胺（DMF）,用铝箔包裹装液管，贮存于-20℃。 100×Denhardt 试剂（Denhardts regent） 成分及终浓度 配制 100ml溶液各成分的用量 2%聚蔗糖（Ficoll，400 型） 2%聚乙烯吡咯烷酮（PVP-40） 2%BSA（组分 V