物化实验-分光光度法测BPB电力平衡常数.doc

分光光度法测BPB 电力平衡常数 【Author and institution of the report 】 Phangheng School of Life Sciences. University of Science and Technology of China . Hefei City.Anhui Province. Postcode:230026 Email:zh322523@mail.ustc.edu.cn 【Abstract 】 This experiment utilize spectrophotometer to find out the maximum absorption wavelength of BPB, and then measure absorbance in different pH, in order to calculate equilibrium constant of ionization of BPB. 【Keywords 】 Spectrophotometer Bromophenol blue Maximum absorption wavelength Absorbance The equilibrium constant of ionization 【前言】 物质分子对光的吸收是物质分子中的价电子从最高占有轨道向最低空轨道跃迁。溶液对单色光的吸收遵守贝尔—朗比定律。每一种物质有自己特征的最大吸收波长。波长为λ的单色光通过 任何均匀而透明的介质时，由于物质对光的吸收作用而使透射光的强度比入射光的强度要弱，其减弱的程度与所用的波长（λ）有关。分子结构不同的物质，对单色光的吸收有选择性。 溴酚蓝是一种酸碱指示剂，本身带有颜色且在有机溶剂中电离度很小，所以用一般的化学分析法或其他物理化学方法很难测定其电离平衡常数。 本实验用分光光度法测定弱电解质溴酚蓝的电离常数，可以得到比较精确的结果。 【实验部分】 1、实验试剂实验试剂 -5105×mol/L溴酚蓝溶液 0.1mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液0.10mol/LHCl溶液 0.10mol/LNaOH溶液1.0mol/LHCl溶液0.20mol/LNaOH溶液 2、实验仪器 HK-2A 型超级恒温水浴锅一台 TU-1901双光束紫外可见分光光度计一台 pH 计一台 10ml 移液管三支 25ml 移液管一支 50ml 移液管一支 3、实验原理 波长为λ的单色光通过任何均匀而透明的介质时，由于物质对光的吸收作用而使透射光的强度（I ）比入射光的强度（I 0）要弱，其减弱的程度与所用的波长（λ）有关。又因分子结构 不相同的物质，对光的吸收有选择性，因此不同的物质在吸收光谱上所出现的吸收峰的位置及其形状，以及在某一波长范围内的吸收峰的数目和峰高都与物质的特性有关。分光光度法是根据物质对光的选择性吸收的特性而建立的，这一特性不仅是研究物质内部结构的基础，也是定性分性、定量分析的基础。 ?根据贝尔—郎比定律，溶液对于单色光的吸收，遵守下列关系式： D I I K l C ==??lg 0(6－1 ? 式中，D －消光（或光密度）；? I /I 0－透光率；? K －摩尔消光系数，它是溶液的特性常数；?l －被测溶液的厚度（即吸收槽的长度）； C －溶液浓度。 ?在分光光度分析中，将每一种单色光，分别、 依次地通过某一溶液，测定溶液对每一种光波的 消光。以消光（D ）对波长（λ）作图，就可以 得到该物质的分光光度曲线，或吸收光谱曲线， 如图6－1所示。由图可以看出，对应于某一波 长有着一个最大的吸收峰，用这一波长的入射光 通过该溶液就有着最佳的灵敏度。 ?从（1）式可以看出，对于固定长度的吸收 槽，在对应最大吸收峰的波长（λ）下，测定不 同浓度C 的消光，就可以作出线性的D ～C 线，这就是定量分析的基础。也就是说，在该波长时， 若溶液遵守贝尔－郎比定律，则可以选择这一波长来进行定量分析。 ?以上讨论是对于单组分溶液的情况，如果溶液中含有多种组分，情况就比较复杂，要进行分别讨论，大致有下列四种情况： ?1、混合物中各组分的特征吸收不相重叠，既在波长λ1时，甲物质显著吸收而其他组分的吸收可以忽略；在波长λ2时，只有乙物质显著吸收，而其他组分的吸收微不足道，这样便可在λ1、λ2波长下分别测定甲、乙物质组分。 2、混合物中各组分的吸收带互相重叠，而且他们都遵守贝尔－郎比定律，对几个组分即可在几个适当的波长进行几次吸光度的测量，然后列几个联立方程式，即可求分别算出几个组分的含量。 3、混合物中各组分的吸收带互相重叠，但不遵守贝尔－郎比定律。 4、混合溶液中含有未知组分的吸收曲线。 第3、4种情况比较复杂，这里不作讨论。 ??本实验用