凝集反应试验ppt课件[文字可编辑].ppt

第二章 抗原抗体反应 1 凝集反应 （ agglutination ） ? 是指 颗粒性抗原 ，例如细菌、红细胞、 螺旋体、细胞性抗原，或可溶性抗原 （或抗体）与载体颗粒结合成 致敏颗粒 后，与相应的抗体（或抗原）在适量的 电解质存在的条件下，经一定时间后凝 聚成肉眼可见的凝集现象。 2 凝集反应的特点 ? 颗粒性抗原 ? 致敏颗粒 ? （可溶性抗原或抗体与载体颗粒结合） ? 电解质的存在 ? 肉眼可见的凝集现象 3 凝集反应的发生分两阶段： ? ①抗原抗体的特异结合 ? ②出现可见的颗粒凝集 4 凝集反应的类型 直接凝集试验 玻片凝集试验： ABO 血型 试管凝集试验：外斐试验，肥达试验 间接凝集试验 正向间接凝集试验 反向间接凝集试验 间接凝集抑制试验 协同凝集试验 间接血凝试验 胶乳凝集试验 明胶凝集试验 5 ? 根据凝集反应中抗原的性质，反应的方 式分为： ? ①直接凝集反应 ? ②间接凝集反应 6 7 直接凝集反应（ direct agglutination ） 细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原， 在适当电解质参与下可直接与相应抗体 结合出现凝集，称为直接凝集反应。参 加反应的颗粒性抗原称为凝集原 （ agglutinogen ），抗体称为凝集素 （ agglutinin ） 。 8 ? 玻片法：（定性） – 细菌鉴定 – ABO 血型的鉴定 ? 试管法： （半定量） – 肥达试验（ Widal test ） --- 伤寒 – 外斐试验（ Weil-Felix test ） --- 立克次体 – 交叉配血试验 9 间接凝集反应 （ indirect agglutination ） ? 将可溶性抗原（或抗体）先吸附或偶联 与免疫无关大小适当的颗粒性载体的表 面，使之成为致敏载体颗粒，然后与相 应抗体（或抗原）作用，在适宜的电解 质存在的条件下，出现特异性凝集现象， 称间接凝集反应（ indirect agglutination ） 或被动凝集反应（ passive agglutination ）。 其敏感度高于直接凝集反应和沉淀反应。 10 常用载体： ? RBC ? 聚苯乙烯胶乳（ polystyrene latex ） ? 明胶颗粒 ? 活性炭 ? 皂土（ bentonite ） ? 火棉胶 11 间接凝集反应分类依据 ? 根据致敏载体用的是抗原（正向）或抗 体（反向） ? 根据载体（ RBC ，胶乳，明胶） ? 根据凝集反应的方式（间接凝集试验， 间接凝集抑制试验，协同凝集试验） 12 间接反应的常见类型 – 间接凝集试验 – 间接血凝试验 – 胶乳凝集试验 – 明胶凝集试验 – 间接凝集反应的应用 13 1 、（正向）间接凝集试验 14 2 反向间接凝集试验 15 3 、间接凝集抑制试验 16 本次实验内容 ? 一、第一次加强免疫 ? 二、 ABO 血型鉴定 17 目的与要求 ? 掌握凝集反应的原理与类型 ? 掌握玻片凝集法操作与结果判断 ? 熟悉 ABO 血型鉴定的原理与操作 18 玻片凝集法 -ABO 血型鉴定 ? 试验目的 ? 通过标准血清抗体鉴定红细胞上 ABO 血型系统抗原，掌握盐水介质法进行 ABO 血型系统正定型的基本操作方法和 结果判断。 19 实验原理 ? 根据 IgM 类特异性血型抗体与红细胞上 特异性抗原结合能够出现凝集反应的原 理，用已知 IgM 类特异性标准抗血清与 被检红细胞在盐水介质中反应（室温）， 若出现凝集想象，表明被检红细胞膜上 有与血型抗体相对应的抗原，从而判断 和鉴定被检者的血型。 20 实验材料与方法 ? 试剂：抗 A 血清，抗 B 血清 ? 材料：玻片，采血针，消毒干棉球，酒 精棉球等 21 实验方法与步骤 ? 1 、标记玻片：取玻片一张，一分为二，分别标记为 抗 A ，抗 B 。 ? 2 、采血：用酒精棉球消毒被检者左手无名指或中指 内侧，用采血针刺破皮肤，用干棉球擦去第一滴血， 稍加挤压，使其流出第二滴血，装入盐水试管，摇匀， 即成血细胞悬液。 ? 3 、加抗血清：滴加抗 A ，抗 B 血清于玻片标记处、 ? 4 、加 RBC ：在抗 A ，抗 B 血清中滴加 RBC 各一滴。 ? 5 、混匀：前后左右摇动，观察有无血细胞凝集出现。 ? 6 、结