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血液脂类测定操作规程
标本采集与处理
1.受检者抽血前二周应保持平衡的饮食习惯,近期体重稳定无外伤,手术等意外情况。并注意如有使用降糖、降脂、降压、避孕药,β-受体阻滞剂,免疫抑制剂,激素药物等,则应根据所用药物特性停药数天或数周后再作血液脂类检测。
2.空腹抽血,TG,脂蛋白,载脂蛋白测定应至少禁食12小时(仅作胆固醇测定不必强求空腹)24小时内不作剧烈运动。抽血前不要久站立。至少应静坐5分钟。抽血时止血带使用不可超过1分钟。
3.标本用血清,也可用肝素或EDTA.Na2抗凝之血浆。EDTA.Na2浓度不宜太高。
4.血标本室温放置不得超过3h,放置30~45分钟后应即时分离出血清(浆)盖封於4℃冰箱中可稳定至少4天,如需长期保存,应於-70℃中冰冻存放,不可反复冻融。
血清总胆固醇(TC)测定
酶法(CHOD~PAP法)
【 试 剂 】
市售现成试剂。
【 操 作 】
按试剂及仪器使用说明书要求设定程序,输入参数用自动或半自动生化分析仪测定(速率法)终点法可手工操作,用普通分光光度计比色测定。波长500nm或520nm。
【 标 本 】
血清(浆)参看本节的标本采集与处理。
【 附 注 】
本法为中华医学会检验学会推荐的TC测定常规方法(中华医学检验杂志,1995、18:185)。
胆固醇标准液以定值参考血清为宜,而不宜用Chol的水溶液作标准。Chol定值质控血清亦不应用作标准液。
主要技术指标:终点法批内CV<1.5%、批间CV≤2.5%。灵敏度:显色剂用酚时,TC5.2mmo1/L(200mg/dl)时的吸光度(A 500nm)约0.30~0.35,故A 500nm=0.005时TC浓度约为0.08mmo1/L(3mg/dL)。测定范围:当血清与试剂用量之比为1:100时其测定的上界为13mmo1/L(500ng/dL)。
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