色谱实验高效液相色谱法定量剖析.ppt

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实验四高效液相色谱法定量分析 实验目的 实验原理 仪器 四、实验内容 五、问题与讨论 六、注意事项 实验目的 1.学习利用峰面积进行色谱定量分析方法; 2.熟悉色谱仪器的开机,关机和操作; 3.熟悉液相色谱工作站的功能 、实验原理 物质的浓度与峰面积成正比,因此峰面积可作为一种定量 指标。若待测组分的标准物质容易得到,则可将未知的多组分 混合物进行色谱分析,直到待测组分与其它物质的色谱峰能分 开为止。将待测组分与标准物质的峰面积进行比较,就能确定 其浓度,这就是利用标准物质进行定量分析的原理。该法是色 普分析中最简单的一种定量方法。 2 A 其中:C、CA为待测组分和标准物质的浓度 A、A。为待测组分和标准物质的色谱峰面积 仪器 Agilent 1100 HPLC 四元泵、自动进样器、C18柱、DAD检测器 溶剂:甲醇(色谱纯)、水(二次蒸馏) 标准样品、未知样品 四、实验内容 1.待仪器稳定后,设置色谱条件,编制色谱方法 2.注册样品,进样,得到谱图;(未知样品和标准样品) 注意:必须在本次实验完全结束才能进样继续进行下一个实验 3.分析未知样品的含量。 4使用HPLc的步骤 启动色谱仪各模块的电溟 1-2分钟后启动色谱工作站 打开泵,设定流量和溶剂比例 打开自动进样器、柱温箱和检测器,使其进入工 作状态 待一切准备就绪,可以开始分析样 ·依次关闭工作站、色谱仪

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